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小鼠骨髓來源內皮祖細胞

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更新時間:2023-04-21 16:29:33瀏覽次數:254

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠骨髓來源內皮祖細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

骨髓

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構,其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代;不建議多次傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

膀胱癌相關蛋白BLCAP抗體 γ-谷氨酰水解封閉多肽 

LYSMD4蛋白抗體 多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移13封閉多肽 

腸道肽轉運蛋白1/小肽轉運蛋白1抗體 富含半胱氨與表皮生長因子樣蛋白1封閉多肽 

巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體 嗜乳桿菌假定蛋白 

鋅指蛋白791抗體 細胞角蛋白19片段(CYFR21-1)封閉多肽 

組蛋白H3 K9甲基轉移抗體 細胞表面趨化因子受體2A封閉多肽 

NSUN4蛋白抗體 鋅指蛋白793封閉多肽 

麻疹病毒融合蛋白F抗體 鉀通道相互作用蛋白3封閉多肽 

巨噬細胞炎性蛋白3樣蛋白1抗體 內皮單核細胞激活肽2封閉多肽 

英文名稱: 2-Naphthoic acid 環指蛋白211封閉多肽 

二磷3核苷抗體 磷化SH2結構域轉化蛋白1封閉多肽 

淋巴細胞相關AF4樣蛋白抗體 轉運蛋白SEC63封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 激活PA200封閉多肽 

磷化B-Raf抗體 RTDR1蛋白封閉多肽 

單羧轉運蛋白2抗體 腎上腺能受體β2/β2-AR封閉多肽 

核糖體蛋白4Y2抗體 9號染色體開放閱讀框115封閉多肽 

神經細胞膜糖蛋白M6b抗體 CD44V4封閉多肽 

鋅指蛋白RIZ1抗體 乳腺癌抵抗標記蛋白1封閉多肽 
小鼠骨髓來源內皮祖細胞MEM (含NEAA、L-丙氨酰-L-,不含酚紅)500mL-

SILAC RPMI-1640 Medium500mL-

雞肺動脈平滑肌細胞培養基100mL雞肺動脈平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持雞肺動脈平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含雞肺動脈平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞肺動脈平滑肌細胞的體外培養。

DMEM低糖 (不含L-、鈉)500mL-

人心肌細胞培養基100mL人心肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人心肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人心肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人心肌細胞的體外培養。

大鼠小腸平滑肌細胞培養基100mL大鼠小腸平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠小腸平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠小腸平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠小腸平滑肌細胞的體外培養。

小鼠前列腺上皮細胞培養基100mL小鼠前列腺上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠前列腺上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠前列腺上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠前列腺上皮細胞的體外培養。

 


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