詳細(xì)介紹
商品詳細(xì)介紹:
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒(méi)有血管,透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,而角膜內(nèi)皮細(xì)胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細(xì)胞是角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞,構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障,通過(guò)離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,維持角膜的半脫水狀態(tài),保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細(xì)胞功能出現(xiàn)紊亂,常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有:①角膜是的無(wú)血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能;②角膜內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)角膜透明性有重要作用;③角膜內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)Na+-K+-ATP活性,維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,防止水分滲入角膜內(nèi),維持角膜實(shí)質(zhì)層相對(duì)脫水狀態(tài),維持透明性。
5.方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合膠原消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 組織來(lái)源 |
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 眼角膜組織 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; |
微管相關(guān)蛋白4抗體 接觸蛋白相關(guān)蛋白3封閉多肽 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒
中心體蛋白1抗體 陽(yáng)離子通道精子相關(guān)蛋白4封閉多肽 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒ELISA
乙酰化組蛋白H4抗體 Ras相關(guān)雌激調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑制蛋白封閉多肽 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng): Cyclin E1 重組人軟骨蛋白聚糖 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)elisa試劑盒
鈣通道電壓依賴(lài)性β1蛋白抗體 His Tag多肽 人抗SS-B/La抗體試劑盒elisa
血管生成受體2抗體 核過(guò)渡蛋白2封閉多肽 人落葉型天皰瘡抗體(PF)檢測(cè)試劑盒elisa
半胱氨8抗體 轉(zhuǎn)胺4封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)ELISA試劑盒
睪丸蛋白聚糖2抗體 磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)試劑盒ELISA
細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體 甲狀腺激受體相互作用15封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng): URI1 乳腺癌抑癌蛋白封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa試劑盒
前列腺E2受體2抗體 鈣依賴(lài)分泌激活蛋白1封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒elisa
趨化因子受體1抗體 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測(cè)試劑盒elisa
雄激結(jié)合蛋白抗體 雞IgY 人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒
跨膜受體蛋白Notch-1抗體 延伸因子4封閉多肽 人沙眼衣原體(CT)試劑盒ELISA
溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族39成員A13抗體 補(bǔ)體C4b-A蛋白封閉多肽 人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA檢測(cè)試劑盒
硫軟骨2抗體 天冬氨-胱氨特異性家族1 P20封閉多肽 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)elisa試劑盒
C型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體 磷化細(xì)胞核因子封閉多肽 人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)試劑盒elisa
腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 跨膜蛋白111封閉多肽 人綠膿桿菌外毒A(PEA)檢測(cè)試劑盒elisa
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞LX-2人肝星形細(xì)胞英文名稱(chēng):LX-21×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告
LX-2+GFP人肝星形細(xì)胞+GFP英文名稱(chēng):LX-2+GFP1×1061640+10%FBS+1%P/S 提供LX-2鑒定報(bào)告
Mahlavu 人肝癌細(xì)胞英文名稱(chēng):Mahlavu 1×106DMEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞英文名稱(chēng):MCF-10A1×106MEGM kit(五管因子)+100ng/ml霍亂毒(終止消化用刀豆)+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告
MCF-7人乳腺癌細(xì)胞英文名稱(chēng):MCF-71×106MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告
MCF-7/Adr人乳腺癌阿霉耐藥細(xì)胞英文名稱(chēng):MCF-7/Adr1×1061640+10%FBS+1%PS+500ng/mL ADR提供STR鑒定報(bào)告
MCF-7+luc人乳腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱(chēng):MCF-7+luc1×106MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島+1%P/S 提供MCF-7細(xì)胞STR鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。