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人肝動脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 13:03:06瀏覽次數:306

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肝動脈組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人肝動脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肝動脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結構細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素,新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應,并且與血管疾病的發展及穩定性有關。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

核糖核L抑制蛋白抗體 泛連接封閉多肽 大鼠甲狀旁腺激(PTH)ELISA試劑盒

乳腺癌細胞3抗體 腺苷單磷活化蛋白激α2封閉多肽 大鼠組胺(HIS)試劑盒ELISA

IRE1蛋白抗體 NCK銜接蛋白2封閉多肽 大鼠白介13(IL-13)ELISA檢測試劑盒

cGMP依賴性蛋白激1抗體 半胱胺-10封閉多肽 大鼠白介15(IL-15)elisa試劑盒

轉化生長因子β1抗體 血管內皮生長因子受體2封閉多肽 大鼠白介16(IL-16)試劑盒elisa

磷化活化復制因子2抗體 血管生成2封閉多肽 大鼠白介17(IL-17)檢測試劑盒elisa

G蛋白偶聯受體釋放因子2抗體 Bax封閉多肽 大鼠白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒

卷曲螺旋結構域蛋白47抗體 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3封閉多肽 大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)試劑盒ELISA

19號染色體開放閱讀框61抗體 ATP敏感鉀離子通道蛋白封閉多肽 大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA檢測試劑盒

粘著斑蛋白抗體 跨膜蛋白TMBIM1封閉多肽 大鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒

SKOR1蛋白抗體 RHOG封閉多肽 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)試劑盒elisa

磷化組蛋白去乙酰化4(Ser246)抗體 磷化真核翻譯延長因子2封閉多肽 大鼠17-酮類固醇(17-KS)檢測試劑盒elisa

C型凝集結構域家族1成員B抗體 EIF3D蛋白封閉多肽 大鼠白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒

分泌細胞凋亡相關蛋白1抗體 鈣結合樣蛋白/神經內分泌腫瘤標記物封閉多肽 大鼠白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒ELISA

磷化細胞周期檢測點激2抗體 跨膜蛋白62封閉多肽 大鼠白介3(IL-3)ELISA檢測試劑盒

磷化微管相關蛋白抗體 含脯氨突觸相關蛋白相互作用蛋白1封閉多肽 大鼠白介5(IL-5)elisa試劑盒

脫羧蛋白體36抗體 重組人白細胞介-1β (活性的, Tag free) 大鼠苗條受體(LR/Ob-R)試劑盒elisa

粘著斑激抗體 血管內皮生長因子D型封閉多肽 大鼠瘦(LEP)檢測試劑盒elisa
人肝動脈平滑肌細胞MDA-MB-415人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-415細胞專用培養基125ML

MDA-MB-415人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-415細胞專用培養基500ML

MDA-MB-435S人黑瘤細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-435S細胞專用培養基125ML

MDA-MB-435S人黑瘤細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-435S細胞專用培養基500ML

MDA-MB-436人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-436細胞專用培養基125ML

MDA-MB-436人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-436細胞專用培養基500ML

MDA-MB-453人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-453細胞專用培養基125ML

 


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