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人胚肺成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 14:11:37瀏覽次數:248

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胚胎;肺組織
人胚肺成纖維細胞的相關產品:Snu-182人肝癌細胞專用培養基細胞培養基125MLSnu-182人肝癌細胞專用培養基細胞培養基500MLSnu-387人肝癌細胞專用培養基細胞培養基125MLSnu-387人肝癌細胞專用培養基細胞培養基500MLSNU-398人胃癌細胞專用培養基細胞培養基125ML

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人胚肺成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

胚胎;肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自胚肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞在合成和分泌細胞因子、維持血管內外和凝血和纖溶的的動態平衡中起重要作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

無毛發蛋白抗體 抑制A/Inhibin βA封閉多肽 人Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(CTX-I)ELISA試劑盒

原癌基因相關蛋白RAP2B抗體 BIVM蛋白封閉多肽 人Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)試劑盒ELISA

RAS家族關聯結構域蛋白9抗體 精神發育遲滯相關蛋白封閉多肽 人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA檢測試劑盒

核心蛋白聚糖抗體 有絲分裂激B封閉多肽 人1型1-磷鞘氨醇受體(S1P1)ELISA試劑盒

轉錄因子MAFF抗體 布氏桿菌菌體蛋白 人17-羥孕烯醇酮試劑盒ELISA

蛋白C抑制因子抗體 干擾epsilon 1蛋白封閉多肽 人17-α-羥化(17-α-OH)檢測試劑盒elisa

血管生成-1抗體 四分子交聯體12/四旋蛋白封閉多肽 人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒

磷化鐵蛋白Fe65抗體 轉錄延伸因子3/ TCEB3封閉多肽 人15-羥基前列腺脫氫(15-PGDH)試劑盒ELISA

英文名稱: IGFBP3 FAM26E蛋白封閉多肽 人15-epi-氧脂 A4(15-epi-LXA4)ELISA檢測試劑盒

甲狀腺受體相互作用蛋白1抗體 腫瘤/睪丸抗原2封閉多肽 人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)ELISA試劑盒

核孔復合體蛋白88抗體 腎連蛋白封閉多肽 人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)試劑盒ELISA

Kelch樣蛋白17抗體 TEX261蛋白封閉多肽 人11-脫氧檢測試劑盒elisa

G蛋白偶聯受體GPR135蛋白抗體 血管生成-1封閉多肽 人11β羥類固醇脫氫1型(11β-HSD1)ELISA試劑盒

腦納前體抗體 MED17封閉多肽 人1,4,5-三磷肌醇(IP3)試劑盒ELISA

細胞死亡防衛蛋白1抗體 重組2-S1蛋白 人1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)ELISA檢測試劑盒

KIAA1109蛋白抗體 重組小鼠H2-Q10蛋白 人 Liprin alpha 1 ELISA試劑盒

PTCD3蛋白抗體 14號染色體開放閱讀框106封閉多肽 人原鈣黏1(PCDH1) ELISA試劑盒

結腸癌抗原8抗體 磷化14-3-3 τ封閉多肽  人白介2受體(IL-2R) 試劑盒 ELISA
人胚肺成纖維細胞人乳腺癌成纖維細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:人乳腺癌成纖維細胞永生化細胞專用培養基500ML

人軟骨細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:人軟骨細胞永生化細胞專用培養基100ML

人軟骨細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:人軟骨細胞永生化細胞專用培養基500ML

小鼠角膜上皮細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠角膜上皮細胞永生化細胞專用培養基100ML

小鼠角膜上皮細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠角膜上皮細胞永生化細胞專用培養基500ML

小鼠肝星狀細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠肝星狀細胞永生化細胞專用培養基100ML

小鼠肝星狀細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠肝星狀細胞永生化細胞專用培養基500ML

 


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