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小鼠冠狀動脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 15:56:52瀏覽次數:224

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 冠狀動脈
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詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優勢型、均衡型、左優勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發自左主動脈竇,經肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分,細胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化,調節血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養的冠狀動脈平滑肌細胞,對研究生理和病理狀態下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠冠狀動脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

冠狀動脈

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

英文名稱: GAB1 重組小鼠糖蛋白gp330蛋白 

MICAL3蛋白抗體 RAB36蛋白封閉多肽 

英文名稱: TAK1/MAP3K7 蛋白激B3封閉多肽 

ADCYAP1單克隆抗體 對接蛋白3封閉多肽 

G蛋白偶聯受體GPR180蛋白抗體 白三烯B4受體1封閉多肽 

DNA聚合Κ抗體 殺傷細胞凝集樣受體F1封閉多肽 

CYP1A2單克隆抗體 Ran結合蛋白MOG1封閉多肽 

血管內皮細胞粘附分子(CD106)抗體 重組人胰島蛋白 

骨形態發生蛋白8b抗體 高遷移率族結合蛋白N4封閉多肽 

眼部白化病相關蛋白OA1/蛋白偶聯受體143抗體 重組豬藍耳病病毒N蛋白 

DNAJC22蛋白抗體 E3泛蛋白連接HECW2封閉多肽 

PSF2蛋白抗體 絲氨/蘇氨蛋白激蛋白封閉多肽 

英文名稱: PDHA1 L12R1蛋白封閉多肽 

γ1氨基丁受體α5/GABRα5抗體 信號轉導和轉錄激活因子3封閉多肽 

PRTG蛋白抗體 Myc Tag多肽 

英文名稱: MMP9 細胞色C氧化蛋白6B2封閉多肽 

英文名稱: Oxytetracycline 促黑細胞激α封閉多肽 

整合αX單克隆抗體 膜相關環指蛋白6封閉多肽 
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞無外泌體血清英文名稱:無外泌體血清50mL

雞血清英文名稱:雞血清100mL

氟英文名稱:5-FU10mg

氟英文名稱:5-FU1g

英文名稱:Taxol10mg

吉西他濱英文名稱:GEM10mg

鹽阿霉英文名稱:ADR25mg
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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