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大鼠精原細胞

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更新時間:2023-04-21 14:46:26瀏覽次數:288

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 睪丸組織
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠精原細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

睪丸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自睪丸組織;睪丸呈微扁的卵圓形,表面光滑,覆蓋著鞘膜臟層;深部是質地堅韌的白膜,在睪丸后緣增厚并進入睪丸,形成睪丸縱膈,縱膈發出許多睪丸小隔深入睪丸實質,將實質分為睪丸小葉,數量約為100~200。每個小葉內約有2~4條生精小管,具有產生精子的作用;生精小管之間的結締組織中有睪丸間質細胞,具有產生雄激素的作用。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管),精直小管進入睪丸縱膈形成睪丸網,之后睪丸網發出12~15條輸出小管通過睪丸后上緣進入附睪。生精小管的生精上皮是精子產生的地方,由生精細胞和支持細胞構成,成人的生精小管有30~70cm長。精子的產生過程包括生精細胞的分化、支持細胞的作用、雄激素的調節等。生精細胞并不是一種細胞,它是多種細胞的統稱,包括精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、精子細胞、精子。前者依次發育分化為后者,且依次從生精上皮的基部到管腔面排列,終形成精子進入到管腔之中,并借助生精上皮外側的肌樣細胞的收縮作用向下一級管腔移動。精原細胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細胞經過多次有絲分裂而形成的細胞。原始的胚細胞經分化形成精原細胞,精原細胞經復制形成初級精母細胞,初級精母細胞經過減數第一次分裂后形成次級精母細胞,再經過減數第二次分裂形成精細胞。精細胞經過變形終形成精子。精原細胞屬于雄性生殖細胞的早期發育階段,能不斷地進行有絲分裂,增加細胞數量,并分化為精母細胞。精原細胞貼近基膜,細胞呈圓形,核大而圓,梁色深。精原細胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力,而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中,通過精原細胞的分裂和分化,由精原細胞產生精母細胞,進入成熟分裂,因而通過增殖可大大增加精母細胞的數量。按理論推算,一個精原細胞通過數次細胞分裂,可形成上百個初級精母細胞。但在生精過程早期,生精細胞很易發生變性,故實際上少于這個數字。在精原細胞的增殖過程中,有一部分Ad型精原細胞不再繼續分裂,而是保留下來,成為新的精原干細胞,因此通過增殖不僅能使精原干細胞不斷得到更新,且能使精原干細胞保持一定數量,從而使精子的產生持續地進行下去,不會枯竭。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合多步消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經AP(堿性磷酸)免疫組化染色鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、GDNF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  圓形、橢圓形

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鋅指蛋白379抗體 微管相關腫瘤抑制蛋白2封閉多肽 人假定蛋白LOC677168 ELISA檢測試劑盒

相關易位膜蛋白2抗體 間充質同源盒蛋白1封閉多肽 人淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)ELISA Kit

ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亞型封閉多肽 人嗜性白血球相關之RNA水解酵家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒

高密度脂蛋白抗體 異質核核糖核蛋白U樣蛋白1封閉多肽 人混合系列蛋白激樣結構域(MLKL)試劑盒 ELISA

型纖溶原激活因子受體(CD87)抗體 巢蛋白1封閉多肽 人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA檢測試劑盒

磷化蛋白激PKMYT1(Ser83)抗體 FIGNL2蛋白封閉多肽 人類似cDNA順序BC027382 ELISA Kit

癌胚抗原相關細胞粘附分子19抗體 蛋白裂解3封閉多肽 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA試劑盒

3號染色體開放閱讀框20抗體 磷化有絲分裂激B封閉多肽 人REST協阻抑因子3(RCOR3)試劑盒 ELISA

細胞表面趨化因子受體2抗體 地中海熱蛋白MEFV封閉多肽 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA檢測試劑盒

快速周期調節蛋白SPDYE1抗體 琥珀裂解封閉多肽 人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA Kit

KB抑制蛋白激β抗體 刺激分子B7-1蛋白封閉多肽 人可溶性髓系細胞觸發受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒

溶質攜帶物家族-1抗體 跨膜蛋白175封閉多肽 人肌抑(MSTN)試劑盒 ELISA

神經囊泡膜蛋白1抗體 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8封閉多肽 人黑瘤衍生亮氨拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA檢測試劑盒

抑癌基因SNF2β抗體 穿膜蛋白DLK1封閉多肽 人二磷尿核苷葡糖醛基轉移2家族肽B4(UGT2B4)ELISA Kit

17號染色體開放閱讀框97抗體 碳酐11封閉多肽 人蛋白磷1調控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒

促甲狀腺β亞單位抗體 細胞因子信號傳導抑制蛋白3封閉多肽 人腺苷三磷結合盒轉運體G2(ABCG2)試劑盒 ELISA

外周蛋白2抗體 磷化B-Raf封閉多肽 人鳥苷解離抑制因子(GDI) ELISA檢測試劑盒

突觸后蛋白CRIPT抗體 乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白封閉多肽 人八聚體轉錄因子(OTF2B) ELISA Kit
大鼠精原細胞大鼠脾源性內皮祖細胞英文名稱:大鼠脾源性內皮祖細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠淋巴管內皮細胞英文名稱:大鼠淋巴管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠淋巴管成纖維細胞英文名稱:大鼠淋巴管成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠骨髓肥大細胞英文名稱:大鼠骨髓肥大細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠骨髓單核細胞英文名稱:大鼠骨髓單核細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠脾淋巴細胞英文名稱:大鼠脾淋巴細胞5×105不提供細胞鑒定報告

大鼠骨髓巨噬細胞英文名稱:大鼠骨髓巨噬細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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