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小鼠腸平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-23 08:58:31瀏覽次數:288

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 小腸組織
小鼠腸平滑肌細胞的相關產品:H1細胞培養添加劑(配套)細胞培養基20mLMatrigel基質膠(相關2)細胞培養基5mLH1細胞專用因子Y27632(相關3)細胞培養基1mgH1細胞鋪底工作液(可替代CA004)細胞培養基100mL干細胞成骨誘導分化試劑盒(培養體系)細胞培養基200mL

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠腸平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

小腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。小腸平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,是小腸結締組織惡性腫瘤中常見的一種。因此,體外小腸平滑肌細胞的培養對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎和前提。此外,體外培養細胞,由于影響因素較為單一,是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

磷化胞吞再循環相關銜接蛋白CENTB1抗體 原肌球蛋白調節蛋白4封閉多肽 

肌球蛋白19/Myosin XIX抗體 磷化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白封閉多肽 

CD8抗體 周期A2封閉多肽 

英文名稱: ACE2 嗅覺受體5H6封閉多肽 

磷鞘氨醇裂解1抗體 鉬輔因子合成蛋白2封閉多肽 

肌微管相關蛋白9抗體 絨毛膜特異性轉錄因子GCM2封閉多肽 

磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體 G蛋白偶聯受體10封閉多肽 

磷化β-連環蛋白/β-連環/β鏈接抗體 小細胞跨膜糖化蛋白封閉多肽 

腺苷環化9抗體 核仁蛋白C23封閉多肽 

乙醇脫氫1抗體 蛋白質酪氨激JAK2封閉多肽 

嗜性粒細胞顆粒關鍵堿性蛋白抗體 PALM3封閉多肽 

快速蛋白A抗體 絲氨/蘇氨蛋白激SRPK2封閉多肽 

E3泛蛋白連接CHIP蛋白抗體 HOMER2封閉多肽 

硫軟骨N-乙酰氨半乳糖胺基轉移2抗體 豬瘟病毒包膜糖蛋白E2封閉多肽 

10號染色體開放閱讀框140抗體 核糖體結合蛋白1封閉多肽 

視網膜母細胞瘤結合蛋白P48抗體 神經特異性轉錄因子DPF1封閉多肽 

19號染色體開放閱讀框42抗體 宮頸癌癌基因4封閉多肽 

免疫球蛋白超家族成員3抗體 髓過氧化物封閉多肽 
小鼠腸平滑肌細胞大鼠支氣管成纖維細胞培養基100mL大鼠支氣管成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠支氣管成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠支氣管成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠支氣管成纖維細胞的體外培養。

AE-2細胞專用培養基125mL×4AE-2細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持AE-2細胞佳的生長狀態。本產品中已包含AE-2細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于AE-2細胞的體外培養。

MS1細胞專用培養基125mL×4MS1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MS1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MS1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MS1細胞的體外培養。

人子宮內膜干細胞培養基100mL人子宮內膜干細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人子宮內膜干細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人子宮內膜干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人子宮內膜干細胞的體外培養。

人真皮淋巴上皮細胞培養基100mL人真皮淋巴上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人真皮淋巴上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人真皮淋巴上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人真皮淋巴上皮細胞的體外培養。

PATU8988細胞專用培養基125mL×4PATU8988細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持PATU8988細胞佳的生長狀態。本產品中已包含PATU8988細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于PATU8988細胞的體外培養。

大鼠晶狀體上皮細胞培養基100mL大鼠晶狀體上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠晶狀體上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠晶狀體上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠晶狀體上皮細胞的體外培養。

 


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