詳細介紹
規格參數:
產品名稱 | 小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞) |
組織來源 | 骨髓 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
4.細胞簡介:
分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態不規則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成,多數呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節;未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答,不能激活T細胞的第二信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
實驗室分離的經CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態 圓形、梭形、多角形,形態多樣
傳代特性 屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到如何處理:
1、首先,觀察培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
SHISA5蛋白抗體 9號染色體開放閱讀框43封閉多肽
CD24抗體 細胞周期調控相關蛋白1封閉多肽
三核苷重復蛋白6B抗體 細胞表面受體PILRβ封閉多肽
囊泡相關膜蛋白4抗體 異質性核糖核蛋白M封閉多肽
肝表達抗菌肽2抗體 親環J封閉多肽
1號染色體開放閱讀框100抗體 半胱胺蛋白-13封閉多肽
磷化細胞分裂周期蛋白16抗體 跨膜蛋白TMED4封閉多肽
磷化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體 Jun激活區域-連接蛋白1封閉多肽
tRNA異亮氨連接抗體 維生D3受體封閉多肽
CD7抗體 磷化細胞分裂周期蛋白25B封閉多肽
肥大細胞表達膜蛋白1抗體 三磷腺苷結合盒轉運體3封閉多肽
英文名稱: Gibberellins PE標記雞卵白蛋白
大腦蛋白2抗體 載脂蛋白E封閉多肽
甲硫氨轉運RNA合成2抗體 褪黑受體1B封閉多肽
GRAM結構域蛋白2抗體 醛糖還原封閉多肽
英文名稱: Cytokeratin 15 磷化蛋白激C亞性D型封閉多肽
巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體 FAM19A1蛋白封閉多肽
甲基化樣蛋白4抗體 FAM18B蛋白封閉多肽
小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)大鼠肝外膽管上皮細胞培養基100mL大鼠肝外膽管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠肝外膽管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠肝外膽管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肝外膽管上皮細胞的體外培養。
DMEM低糖 (含L-丙氨酰-L-,不含鈉)500mL-
SW 1990細胞專用培養基(L15)125mL×4SW 1990細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SW 1990細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SW 1990細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW 1990細胞的體外培養。
293E細胞專用培養基125mL×4293E細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持293E細胞佳的生長狀態。本產品中已包含293E細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293E細胞的體外培養。
大鼠食管平滑肌細胞培養基100mL大鼠食管平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠食管平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠食管平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠食管平滑肌細胞的體外培養。
M199(含HEPES)500mL-
RK1細胞專用培養基125mL×4RK1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持RK1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含RK1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RK1細胞的體外培養。