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小鼠骨髓間充質干細胞

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更新時間:2023-04-23 10:14:01瀏覽次數:259

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠骨髓間充質干細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

骨髓

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養條件要求較高,在培養過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

NDST2蛋白抗體 細胞色b245輕鏈封閉多肽 

二肽氨基肽3抗體 成纖維細胞生長因子23封閉多肽 

過氧化活化增生受體γ單克隆抗體 補體C5β鏈封閉多肽 

受體酪氨激單克隆抗體 甘露聚糖結合凝集封閉多肽 

維甲早期轉錄1G蛋白抗體 GDP甘露糖焦磷化封閉多肽 

溶血磷脂酰基轉移β抗體 人乙肝病毒pre S1/S2蛋白封閉多肽 

DPY30蛋白抗體 附睪特異蛋白10封閉多肽 

鈣加壓2抗體 鋅指蛋白297封閉多肽 

蛋白激A2抗體 RAS相關GTP結合蛋白A封閉多肽 

白細胞介-10抗體 破傷風毒輕鏈封閉多肽 

異質核糖核蛋白A0抗體 干擾α-1b/IFN a1b封閉多肽 

磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 磷化細胞角蛋白18封閉多肽 

/葡萄糖協同轉運蛋白2抗體 HORMAD1蛋白封閉多肽 

DNAJC1蛋白抗體 轉鐵蛋白封閉多肽 

G蛋白信號轉導調節因子8抗體 環腺苷應答元件結合蛋白樣蛋白2封閉多肽 

ADP-核糖基化因子核苷交換蛋白100抗體 磷脂DDHD2封閉多肽 

跨膜蛋白Sema3C抗體 (進口) 

造血干細胞特異性蛋白抗體 N-甲基嘌呤DNA糖基化 
小鼠骨髓間充質干細胞DMEM無糖(不含酚紅、鈉)500mL-

A-498細胞專用培養基125mL×4A-498細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持A-498細胞佳的生長狀態。本產品中已包含A-498細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于A-498細胞的體外培養。

SCC-9 [SCC 9; SCC9]細胞專用培養基125mL×4SCC-9 [SCC 9; SCC9]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SCC-9 [SCC 9; SCC9]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SCC-9 [SCC 9; SCC9]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SCC-9 [SCC 9; SCC9]細胞的體外培養。

大鼠冠狀動脈成纖維細胞培養基100mL大鼠冠狀動脈成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠冠狀動脈成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠冠狀動脈成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠冠狀動脈成纖維細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

人腦動脈血管平滑肌細胞培養基100mL人腦動脈血管平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人腦動脈血管平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人腦動脈血管平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人腦動脈血管平滑肌細胞的體外培養。

NCI-H1944細胞專用培養基125mL×4NCI-H1944細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持NCI-H1944細胞佳的生長狀態。本產品中已包含NCI-H1944細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H1944細胞的體外培養。

CTLA4 Ig-24細胞專用培養基125mL×4CTLA4 Ig-24細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持CTLA4 Ig-24細胞佳的生長狀態。本產品中已包含CTLA4 Ig-24細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CTLA4 Ig-24細胞的體外培養。

 


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