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小鼠肝星狀細胞

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更新時間:2023-04-23 10:56:12瀏覽次數:246

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肝臟組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠肝星狀細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肝臟組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞(HSC)又名肝貯脂細胞、維生素A貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等,是肝臟細胞外基質的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞,各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細胞。正常情況下,HSC處于靜止狀態,當肝臟發生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時,HSC的表型由靜止型轉變為激活型,激活的HSC可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內結構的重建,此過程也是肝纖維化的中心環節。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內,是合成、分泌細胞外基質的主要來源,在肝纖維化的發生中處于重要地位。肝星形細胞是肝臟*的間充質細胞,約占肝臟細胞總數的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分,合成一定量的膠原以維持正常的基底膜結構,還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環調節。此外,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

肝黃單加氧1抗體 大腦和睪丸特異性免疫球蛋白超家族成員11封閉多肽 

精子細胞成熟蛋白1抗體 成纖維細胞生長因子受體1原癌基因伴侶蛋白封閉多肽 

英文名稱: Natrexone 蛋氨亞砜還原MSRA封閉多肽 

IQCJ抗體 腫瘤抑制基因LPP2封閉多肽 

Cyclin A1相互作用蛋白抗體 DNA連接4封閉多肽 

粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體 琥珀脫氫的組合因子1封閉多肽 

Wnt1誘導信號通路蛋白2抗體 鋅指蛋白635封閉多肽 

英文名稱: DDAH2 嗅覺受體52K2封閉多肽 

泛蛋白連接D3抗體 重組紅色熒光蛋白 

電壓門控鉀通道亞基Kv7.5抗體 線粒體核糖體蛋白L12封閉多肽 

肌微管相關蛋白7抗體 磷化核糖體S6蛋白激封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 磷化T細胞激活核轉錄因子4封閉多肽 

成對樣同源結構域轉錄因子2抗體 發育多能性相關蛋白3封閉多肽 

NDUAB蛋白抗體 有絲分裂氧化1封閉多肽 

自主生長因子1B抗體 類表皮生長因子域7封閉多肽 

鋅指蛋白99抗體 細胞色P450 1A1+1A2封閉多肽 

瘦抗體 神經降壓受體1封閉多肽 

DENND5A蛋白抗體 核糖體蛋白L23A封閉多肽 
小鼠肝星狀細胞GES-1 (人胃黏膜細胞)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

大鼠肝竇內皮細胞5×10?Cells/T25培養瓶

兔外周血巨噬細胞5×10?Cells/T25培養瓶

C3H/10T1/2, Clone 8 (小鼠胚胎成纖維細胞) (種屬鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

BT-549 (人乳腺管癌細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+0.01mg/ml Insulin+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

MV3 (人黑色瘤細胞)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

小鼠下腔靜脈內皮細胞5×10?Cells/T25培養瓶

 


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