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人表皮角質形成細胞

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更新時間:2023-04-21 14:14:08瀏覽次數:244

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人表皮角質形成細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

皮膚組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角質形成細胞是一種能合成角質蛋白的上皮細胞,此類細胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質細胞中,細胞核與細胞器消失,細胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機體尚有保護作用,故不必在洗擦身體時用力搓擦,使其過早脫失。表皮角質形成細胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細胞產生角化并移向表皮。體外培養的表皮角化細胞容易導致終末分化,不能充分增殖。角質形成細胞終產生角質蛋白,在其向角質細胞演變過程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質層。有人把前三層或前二層稱為生發層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質層下方還可見到透明層。

5.方法簡介:

實驗室分離的先中性dan白消化、后胰dan白 - 膠原混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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人表皮角質形成細胞人氣管上皮細胞英文名稱:人氣管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人氣管平滑肌細胞英文名稱:人氣管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人支氣管上皮細胞英文名稱:人支氣管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人支氣管平滑肌細胞英文名稱:人支氣管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人肺成纖維細胞英文名稱:人肺成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人肺動脈內皮細胞英文名稱:人肺動脈內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人肺動脈高壓血管內皮細胞英文名稱:人肺動脈高壓血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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