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大鼠腸成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 09:21:55瀏覽次數:223

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腸組織
大鼠腸成纖維細胞的相關產品:原代角質形成細胞培養體系細胞培養基500mL原代巨噬細胞培養體系細胞培養基100mL原代巨噬細胞培養體系細胞培養基500mL原代間充質干細胞無血清培養體系細胞培養基100mL原代間充質干細胞無血清培養體系細胞培養基500mL

詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠腸成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至gang門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經gang門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內大的微生態系統。各種哺乳動物腸的結構和功能基本相似。腸壁結構一般分4層,由外向內依次為:漿膜層(腹腔臟層),平滑肌層,黏膜下層和黏膜層。平滑肌層的外層為縱行肌纖維,內層為環形肌纖維,兩者都以螺旋式走行,它們以收縮和舒張來完成腸的機械性消化。黏膜層又分為3層:靠近黏膜下層的是一層平滑肌,稱為黏膜肌層。其次為結締組織,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構成的黏膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-胰聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鈣磷蛋白2抗體 磷化神經細胞特異性微管蛋白封閉多肽 

FGD4蛋白抗體 細胞色氧化缺失蛋白2封閉多肽 

粘蛋白3抗體 轉運蛋白家族39成員7封閉多肽 

FBXL3蛋白抗體 20號染色體開放閱讀框144封閉多肽 

脫氧鳥苷激抗體 纖維蛋白肽A封閉多肽 

皮層蛋白結合蛋白2N端樣蛋白抗體 鋅指蛋白167封閉多肽 

高爾基體磷蛋白6抗體 B淋巴細胞白血病前體蛋白轉錄因子2封閉多肽 

磷化微管結合蛋白CYLD抗體 中間絲相關蛋白封閉多肽 

C型凝集結構域家族4成員A抗體 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白8封閉多肽 

腎囊腫蛋白1抗體 腫瘤壞死因子配體超家族成員18封閉多肽 

隱花色蛋白1抗體 清道夫受體B2封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白S10抗體 磷化Disabled 1封閉多肽 

雙特異性蛋白磷6/絲裂原活化蛋白激磷3抗體 促腎上腺皮質釋放激受體2封閉多肽 

核苷腺苷轉移2抗體 CD44封閉多肽 

ATP結合盒轉運家族蛋白13抗體 SPG48蛋白封閉多肽 

膜類胰1抗體 酪氨蛋白激3封閉多肽 

凋亡誘導蛋白D抗體 結合珠蛋白家族3A1封閉多肽 

同源盒蛋白SIX1抗體 長鏈烯脂酰水化封閉多肽 
大鼠腸成纖維細胞人卵巢顆粒細胞培養基100mL人卵巢顆粒細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人卵巢顆粒細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人卵巢顆粒細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人卵巢顆粒細胞的體外培養。

Jurkat, Clone E6-1細胞專用培養基125mL×4Jurkat, Clone E6-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持Jurkat, Clone E6-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含Jurkat, Clone E6-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Jurkat, Clone E6-1細胞的體外培養。

兔肝內膽管上皮細胞培養基100mL兔肝內膽管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔肝內膽管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔肝內膽管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔肝內膽管上皮細胞的體外培養。

HEC-1-A細胞專用培養基125mL×4HEC-1-A細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持HEC-1-A細胞佳的生長狀態。本產品中已包含HEC-1-A細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HEC-1-A細胞的體外培養。

兔膀胱平滑肌細胞培養基100mL兔膀胱平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔膀胱平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔膀胱平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔膀胱平滑肌細胞的體外培養。

MFC細胞專用培養基125mL×4MFC細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MFC細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MFC細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MFC細胞的體外培養。

兔肺成纖維細胞培養基100mL兔肺成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔肺成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔肺成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔肺成纖維細胞的體外培養。


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