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人血管外膜成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 10:54:41瀏覽次數:287

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 血管組織
人血管外膜成纖維細胞的相關產品:MS1 (小鼠胰島內皮細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶MDA-MB-436 (人乳腺癌細胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶RKO (人結腸腺癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶NCI-H1703 (人肺鱗癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶大鼠角膜成纖

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人血管外膜成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

血管組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自血管外膜組織;血管外膜是由疏松結締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結締組織細胞以成纖維細胞為主,當血管受損傷時,成纖維細胞具有修復外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一,其主要生理功能合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

骨形態形成蛋白拮抗蛋白3抗體 缺氧誘導因子1α/HIF-1α 封閉多肽 

嗜粒細胞趨化蛋白CCL6抗體 端粒結合蛋白2封閉多肽 

蛋白磷激PKC/CPI-17抗體 腦蛋白絲氨/蘇氨激29封閉多肽 

腺苷硫激1抗體 伸展蛋白SNPH封閉多肽 

KIAA1462蛋白抗體 絲氨組合因子4封閉多肽 

溶質載體家族蛋白39成員A2抗體 NADSYN1蛋白封閉多肽 

肝臟型脂肪結合蛋白抗體 ISLR蛋白封閉多肽 

絲氨蛋白激1抗體 磷脂磷LPIN3封閉多肽 

微管相關末端結合蛋白2抗體 重組2核衣殼蛋白 

突觸泡蛋白2A抗體 突觸結合蛋白樣蛋白4封閉多肽 

英文名稱: PRDX2 表皮生長因子樣激受體1 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 整合α11封閉多肽 

肝癌缺失基因1/2抗體 生物標記重組人CD122/IL2RB蛋白 

血藍蛋白抗體 Cy3標記胰糜 

卷曲螺旋結構域蛋白147抗體 二磷3核苷封閉多肽 

表皮生長因子受體底物8抗體 磷化MCM2蛋白封閉多肽 

磷化膜相關蛋白Numb抗體 荷爾蒙敏感脂肪封閉多肽 

乳腺腫瘤新因子1抗體 白細胞介增強子結合因子3封閉多肽 
人血管外膜成纖維細胞AML-193 (人急性單核細胞白血病單核細胞)IMDM+5μg/ml Insulin+5μg/ml Transferrin+5ng/ml GM-CSF+5% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

小鼠前脂肪細胞5×10?Cells/T25培養瓶

HCC1937 (人乳腺癌細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

小鼠腸巨噬細胞5×10?Cells/T25培養瓶

豬脂肪間充質干細胞5×10?Cells/T25培養瓶

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞) (種屬鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶

小鼠肺動脈成纖維細胞5×10?Cells/T25培養瓶

 


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