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人腦成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 16:03:17瀏覽次數:219

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
人腦成纖維細胞的相關產品:大鼠角質形成細胞原代細胞5×105大鼠表皮干細胞原代細胞5×105大鼠前脂肪細胞原代細胞5×105大鼠脂肪微血管內皮細胞原代細胞5×105大鼠真皮毛乳頭細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人腦成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

絲氨45抗體 ATP結合盒轉運家族蛋白9封閉多肽 

磷化肝癌缺失基因1抗體 GalNAc-T14封閉多肽 

P21蛋白激活的蛋白激6抗體 β-連環蛋白/β-連環/β鏈接封閉多肽 

醛糖還原相關蛋白質抗體 FC段IgE受體α多肽/Fc ε RIα封閉多肽 

Cy5.5標記小鼠抗人CD20單克隆抗體 檸檬合成CISY封閉多肽 

雙特異性磷抗體11抗體 LENG1蛋白封閉多肽 

分泌型磷脂A2抗體 中心體相關蛋白激Nek2封閉多肽 

磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體 炭疽桿菌致死因子LF封閉多肽 

泛蛋白連接抗體 ABC膜轉運蛋白封閉多肽 

甲基轉移樣蛋白3抗體 FAM101B蛋白封閉多肽 

英文名稱: FOXA1 細胞毒性受體NK-p46封閉多肽 

PDZ結構域PDZK6蛋白抗體 脂肪水解LIPJ封閉多肽 

細胞生長抑制基因39蛋白抗體 Bcl-2封閉多肽 

泛連接CUL7蛋白抗體 血栓調節蛋白封閉多肽 

同源轉錄因子DLX5抗體 活化的Notch1蛋白封閉多肽 

FAM59A蛋白抗體 類腫瘤性抗原MA3封閉多肽 

粘結蛋白SA1抗體 核孔復合蛋白Nup43封閉多肽 

囊泡胺轉運蛋白1家族蛋白抗體 含SH2結構域接頭蛋白B封閉多肽 
人腦成纖維細胞亞油英文名稱:亞油0.2mL

N2添加劑英文名稱:N25mL

B27無血清添加劑英文名稱:B2710mL

PBS緩沖液英文名稱:PBS500mL

DAPI英文名稱:DAPI10mL(即用型)

Triton X-100英文名稱:Triton X-10010mL

Fluoromount-G熒光封片劑英文名稱:Fluoromount-G熒光封片劑25mL
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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