詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來(lái)源 |
大鼠胰島β細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 胰腺組織 |
商品詳細(xì)介紹:
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳suan氫鈉、胰dan白原、脂肪、淀粉等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長(zhǎng)抑su,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞,即胰島B細(xì)胞,是胰島細(xì)胞的一種,屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種,能分泌胰島素,與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損、胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足(胰島素抵抗),會(huì)使血糖升高,從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細(xì)胞癌變會(huì)生成胰島素瘤,引起惡性血糖降低癥狀。
5.方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的采用先用膠原消化分離得到胰島、再用胰逐級(jí)消化胰島制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Insulin含量檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; |
KIAA1486蛋白抗體 干擾調(diào)節(jié)因子3封閉多肽
磷化激M2抗體 蛋氨亞砜還原B3封閉多肽
糖蛋白gp330抗體 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框109封閉多肽
皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子抗體 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7封閉多肽
轉(zhuǎn)導(dǎo)β樣蛋白1抗體 磷化血管生成受體2封閉多肽
染色體相關(guān)蛋白CAP抗體 泛樣蛋白特異性2封閉多肽
磷化p21激活激1/2/3抗體 CTP合成2封閉多肽
巖藻糖轉(zhuǎn)移1抗體 跨膜蛋白180封閉多肽
線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體 KIAA0355蛋白封閉多肽
NLRP11蛋白抗體 G蛋白家族RAB21蛋白封閉多肽
補(bǔ)體C4BPA蛋白抗體 RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)ab6C封閉多肽
E3泛連接抗體 分泌載體膜蛋白2封閉多肽
鉀離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 IMPG2蛋白封閉多肽
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白11抗體 HS6ST3蛋白封閉多肽
磷化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 DNAJC15封閉多肽
鋅指蛋白530抗體 神經(jīng)氨4封閉多肽
糖尿病相關(guān)同源結(jié)構(gòu)域蛋白SIX5抗體 磷化白細(xì)胞介-7受體a封閉多肽
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體 鉀離子通道蛋白5封閉多肽
大鼠胰島β細(xì)胞10×多聚賴氨英文名稱:10×多聚賴氨10mL
明膠水溶液英文名稱:Gelatin100mL
膠原I英文名稱:膠原I100mg
膠原II英文名稱:膠原II100mg
膠原IV英文名稱:膠原IV100mg
細(xì)胞組織運(yùn)輸保存液英文名稱:細(xì)胞組織運(yùn)輸保存液500mL
小鼠重組 LIF 英文名稱:LIF MouseRecombinant10ug