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大鼠大隱靜脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 14:50:53瀏覽次數:228

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 大隱靜脈組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠大隱靜脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

大隱靜脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自大隱靜脈;大隱靜脈起于足背靜脈弓內側端,經內踝前方,沿小腿內側緣伴隱神經上行,經股骨內側髁后方,進入大腿內側部,與股內側皮神經伴行,逐漸向前上,在恥骨結節外下方穿隱靜脈裂孔,匯入股靜脈,其匯入點稱為隱股點。有5條屬支:旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內側淺靜脈和股外側淺靜脈,它們匯入大隱靜脈的形式多樣,相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時,須分別結扎、切斷各屬支,以防復發。大隱靜脈平滑肌細胞主要功能:①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發血管病發的重要異常因素;②參與血管壁的炎癥反應,并與血管疾病的進展和穩定有關。因此,研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

胚胎干細胞RAS蛋白抗體 prox-1封閉多肽 人硫肝糖蛋白(HSPG)ELISA檢測試劑盒

纖溶原激活物抑制因子抗體 磷化巨噬細胞集落刺激因子受體封閉多肽 人冷球蛋白(CG)ELISA Kit

NUDT16蛋白抗體 鋅指蛋白BED5封閉多肽 人紅細胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒

磷化丁鹽反應因子1抗體 絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白2封閉多肽 人高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒 ELISA

細胞色c氧化1單克隆抗體 磷脂DDHD1封閉多肽 人低分子肝(LMWH) ELISA檢測試劑盒

eIF2Bδ蛋白抗體 纖維母細胞生長因子受體底物3封閉多肽 人補體3裂解產物(C3SP) ELISA Kit

三磷腺苷受體受體P2X2抗體 磷化細胞轉錄因子ELK1封閉多肽 人補體片段3b受體(C3bR) ELISA試劑盒

卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD5抗體 LYSMD2蛋白封閉多肽 人補體1抑制物抗體(C1INH) 試劑盒 ELISA

鋅指蛋白660抗體 生殖細胞相關1樣蛋白封閉多肽 人B因子(BF) ELISA檢測試劑盒

一氧化氮合成-1(神經型)抗體 SH2B蛋白封閉多肽 人類白細胞抗原G(HLA-G)ELISA Kit

轉運蛋白TRAPPC11抗體 1號染色體開放閱讀框227封閉多肽 人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒

乙酰轉移13抗體 FGD2蛋白封閉多肽 人補體片斷4b(C4b)試劑盒 ELISA

6號染色體開放閱讀框201抗體 6號染色體開放閱讀框20封閉多肽 人補體片斷5b(C5b)ELISA檢測試劑盒

SAMD7蛋白抗體 膠質瘤發病相關蛋白1樣蛋白2封閉多肽 重鏈(IgH)ELISA Kit

ras癌基因家族RAB8B抗體 RNA結合蛋白56封閉多肽 重鏈可變區(IgHV)ELISA試劑盒

同源盒蛋白MEIS3抗體 白介4封閉多肽 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒 ELISA

鋅指蛋白403/喉癌相關蛋白1抗體 脂肪去飽和6封閉多肽 人血紅蛋白晚期糖基化終末產物(Hb-AGE)ELISA檢測試劑盒

γ氨基丁轉氨抗體 絲氨羧甲半胱氨合成封閉多肽 人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA Kit
大鼠大隱靜脈平滑肌細胞小鼠心房心肌細胞英文名稱:小鼠心房心肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠心室心肌細胞英文名稱:小鼠心室心肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠心肌成纖維細胞英文名稱:小鼠心肌成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠主動脈內皮細胞英文名稱:小鼠主動脈內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠主動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠主動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠主動脈外膜成纖維細胞英文名稱:小鼠主動脈外膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠冠狀動脈內皮細胞英文名稱:小鼠冠狀動脈內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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