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小鼠腎小球上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:09:10瀏覽次數(shù):255

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腎組織
小鼠腎小球上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MFC-GFP (小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人外周血淋巴細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶SW620 (人結(jié)腸癌細(xì)胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NRK-52E (大鼠腎細(xì)胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人外周血樹(shù)突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)5×10?Cells

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠腎小球上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腎組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基suan、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)suan堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小球是腎元中的用于將血液過(guò)濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球。腎小球上皮細(xì)胞是由間充質(zhì)細(xì)胞分化發(fā)育、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細(xì)胞,是腎小球的固有細(xì)胞之一,也是構(gòu)成腎小球?yàn)V過(guò)膜的重要組成部分。腎小球上皮細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)和功能是腎單位濾過(guò)及腎小球微環(huán)境穩(wěn)定的重要保障。腎小球?yàn)V過(guò)膜的外層為上皮細(xì)胞層,厚約40nm,腎小球上皮細(xì)胞是腎小囊的臟層上皮細(xì)胞,貼附于腎小球血管外側(cè)基底膜上。上皮細(xì)胞又稱足細(xì)胞,足細(xì)胞的不規(guī)則突起為足突,其間有許多狹小間隙,血液經(jīng)濾過(guò)膜過(guò)濾入腎小球囊。腎小球上皮細(xì)胞可通過(guò)合成和分泌腎上腺髓質(zhì)肽抑制系膜細(xì)胞增殖,腎上腺髓質(zhì)肽作為一種重要的旁分泌因子,可保持腎小球微環(huán)境穩(wěn)定,并參與腎小球的炎癥過(guò)程。體外培養(yǎng)的腎小球上皮細(xì)胞對(duì)各型腎小球腎炎具有重要的研究?jī)r(jià)值。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

二磷腺苷核糖基化因子核苷交換因子2抗體 孤兒核受體蛋白Nur77封閉多肽 

CD34單克隆抗體 細(xì)胞分裂周期蛋白25C封閉多肽 

酪氨蛋白激受體B6抗體 細(xì)胞周期依賴性激抑制相關(guān)蛋白封閉多肽 

胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1抗體 尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1封閉多肽 

乙基丙二腦病蛋白抗體 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體128抗體 腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1封閉多肽 

環(huán)指蛋白56抗體 β-葡萄糖腦苷脂封閉多肽 

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子HNT抗體 3-氨基-2-惡唑烷酮雞卵白蛋白偶聯(lián)物 

鋅指蛋白20抗體 碳酐4封閉多肽 

鋅指蛋白701抗體 重組人GUCY2C蛋白 

通用轉(zhuǎn)錄因子IIF亞基2/TFIIF RAP 30抗體 附睪精子結(jié)合蛋白1封閉多肽 

英文名稱: SGK1 原鈣粘附蛋白α4封閉多肽 

雌激調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1封閉多肽 

英文名稱: CR1 核受體共激活劑1封閉多肽 

MAN1C1蛋白抗體 血小板源性生長(zhǎng)因子D/脊髓源性生長(zhǎng)因子B封閉多肽 

β2-微球蛋白單克隆抗體 組織相關(guān)抗原HLA-B15封閉多肽 

開(kāi)關(guān)相關(guān)蛋白70單克隆抗體 長(zhǎng)鏈脂肪連接1/2封閉多肽 

SMCR7L蛋白抗體 粘附相關(guān)激封閉多肽 
小鼠腎小球上皮細(xì)胞人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人胚肺成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人胚肺成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人胚肺成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

RPMI-1640無(wú)糖(含HEPES)500mL-

William's E(含L-丙氨酰-)500mL-

人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人前列腺成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人前列腺成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人前列腺成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

雞骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL雞骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持雞骨骼肌細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞骨骼肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于雞骨骼肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Ham's F-12(不含L-)500mL-

RPMI-1640培養(yǎng)基(含20%FBS)125mL×4RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國(guó)紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(Roswell Park Memorial Institute,RPMI)開(kāi)發(fā)出來(lái)的,RPMI是該研究所開(kāi)發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號(hào)。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy's 5A培養(yǎng)基,使用碳?xì)潲}緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和癌細(xì)胞的培養(yǎng),尤其是懸浮細(xì)胞的培養(yǎng),是使用為廣泛的培養(yǎng)基之一。


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