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產品名稱:DMEM(低糖)基礎培養基細胞
英文名稱:DMEM(低糖)
貨號:BJ-01X1984
產品規格:500ml
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬抗狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)聯免疫吸附測定試劑盒 4-氧雞蛋白蛋白 90%對苯乙 97%
豬不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)聯免疫吸附測定試劑盒4-氧過氧化氫 3500 units/mg 芐 AR,99.00%
豬二氫硫辛轉乙酰(DLAT)聯免疫吸附測定試劑盒三乙烯四六乙纖維素(粉末) 1萬U/g芐 CP,98.5%
豬蛋白酪氨磷受體B(PTPRB)聯免疫吸附測定試劑盒三乙烯四六乙纖維素(液體) 2.5萬U/ml二乙二丁醋酯 98%
豬白介素2受體α(IL-2Rα/CD25)聯免疫吸附測定試劑盒三乙烯四六乙過氧化氫 2萬units/mg二芐 98%
豬表面膜免疫球蛋白D(mIgD)聯免疫吸附測定試劑盒 扁桃過氧化氫 3.5萬units/mg二乙二二乙 98%
豬周期素D1(CCND1)聯免疫吸附測定試劑盒 扁桃葡萄糖氧化 150-180U/mg乙二二 standard for GC,≥99.5% (GC)
豬抗中性粒彈性蛋白抗體(ANEA)聯免疫吸附測定試劑盒扁桃葡萄糖氧化 100U/mg乙二二 AR,99.5%(GC)
豬胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)聯免疫吸附測定試劑盒11-氨十一烷脂肪 10萬U/g乙二二 CP ,99%
豬肝配蛋白A3 (EFNA3)聯免疫吸附測定試劑盒11-氨十一烷胰脂肪 牛胰腺,powder, 15-35 units/mg乙二二 光譜純, ≥99.5%
豬半胱天冬3(CASP3)聯免疫吸附測定試劑盒11-氨十一烷果膠 3萬U/g乙二二 分析標準品,≥99.7% (GC)
豬水通道蛋白3(AQP-3)聯免疫吸附測定試劑盒 二十二烷偏鋁鈉 AR乙二二 for HPLC, 99.5%
豬II型前膠原羧端原肽(PIICP)聯免疫吸附測定試劑盒二十二烷L-色氨 99%二乙二二 >99.0%(GC)
豬泛素特異性肽8 (USP8)聯免疫吸附測定試劑盒二十二烷DL-色氨 99%二乙二二 standard for GC, ≥99.5% (GC)
豬XIII型膠原 (COL13)聯免疫吸附測定試劑盒十五烷D-色氨 98%二乙二二 ≥99.5% (GC)
豬肺表面活性物質相關蛋白B(SPB)聯免疫吸附測定試劑盒十五烷納他霉素 ≥95% (HPLC)二乙二二 無水級, 99.5%
DMEM(低糖)基礎培養基細胞谷胱甘肽硫轉移ω1抗體雙氫(標準品) HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose
間隙連接蛋白31抗體植提標準品 HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose
甘氨-N-轉移雙去氧姜黃素 D-(+)-Maltose monohydrate
G蛋白偶聯受體75抗體雙去氧姜黃素(標準品) ONX0914;PR957
GATA結合蛋白4抗體雙(標準品) N-Nonanoyl-N-methylglucamine
兔抗γ1氨丁抗體水防風(標準品) Methyl cellulose
G蛋白偶聯受體GPR85蛋白抗體水飛賓(標準品) Methyl cellulose, middle viscosity
慶大霉素抗體水寧 D-(-)-Ribose
半乳糖凝集素9抗體水薊亭 D-(-)-Ribose
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。