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小鼠小腸Cajal間質細胞

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更新時間:2023-04-21 14:52:19瀏覽次數:331

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 小腸組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠小腸Cajal間質細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

小腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。Cajal間質細胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質細胞,是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞,與肌細胞以及末梢神經元有著緊密的關系,具有激發和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術,清楚觀察到了ICC位置分布和內部精細結構;應用免疫熒光等生化技術,發現了其特殊表達的c-kit蛋白;利用電生理技術,得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關。多年來,學者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發現了ICC的蹤跡,并試圖闡述其與某些疾病的發生機制。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經c-kit免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  不建議傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

腦衰蛋白反應調節蛋白4抗體 絨毛蛋白封閉多肽 人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒

髓系細胞觸發受體1抗體 Nano-Tag (15) 多肽 人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒 ELISA

組蛋白去甲基轉移JMJD7抗體 磷化D酪氨激衰減蛋白2封閉多肽 人Ⅸ(FⅨ)ELISA檢測試劑盒

鈣粘蛋白16抗體 磷化Fas相關死亡結構域蛋白封閉多肽 人Ⅹ(FⅩ)ELISA Kit

1號染色體開放閱讀框103抗體 CD318封閉多肽 人血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)ELISA試劑盒

富含嘌呤元件結合蛋白A抗體 紅細胞磷脂酰肌醇聚糖A封閉多肽 人纖溶抗纖溶復合物(PAP)試劑盒 ELISA

降鈣基因相關肽1/2抗體 ECHDC1蛋白封閉多肽 人抗復合物(TAT)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: COPS3 軸突蛋白3 beta封閉多肽 人抗受體(ATR)ELISA Kit

葡萄糖轉運蛋白4增強因子抗體 去整合樣金屬18封閉多肽 人受體(TR)ELISA試劑盒

8號染色體開放閱讀框58抗體 鋅結合乙醇脫氫結構域蛋白1封閉多肽 人第八因子相關抗原(FⅧAg)試劑盒 ELISA

磷化真核翻譯起始因子4B抗體 性神經鞘磷脂封閉多肽 人血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒

SPIRE2蛋白抗體 重組小鼠鳥苷激GMK蛋白 人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA Kit

磷化富含脯氨的酪氨激2抗體 血栓調節蛋白封閉多肽 人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒

表皮生長因子抗體 驅動蛋白家族成員5C封閉多肽 人血栓前體蛋白(TpP)試劑盒 ELISA

SHROOM4蛋白抗體 磷化樁蛋白Paxillin封閉多肽 人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58) ELISA檢測試劑盒

英文名稱: FOXP1 β淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1封閉多肽 人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA Kit

腫瘤壞死因子-α單克隆抗體 磷化轉錄調節因子CEBP α 封閉多肽 人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒

神經營養因子抗體 3號染色體開放閱讀框21封閉多肽 人載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 ELISA
小鼠小腸Cajal間質細胞小鼠主動脈瓣膜間質細胞英文名稱:小鼠主動脈瓣膜間質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠大隱靜脈內皮細胞英文名稱:小鼠大隱靜脈內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腎動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠腎動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腎動脈內皮細胞英文名稱:小鼠腎動脈內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠胸主動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠胸主動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠食管上皮細胞英文名稱:小鼠食管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠食管平滑肌細胞英文名稱:小鼠食管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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