詳細介紹
商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿suan等),使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規則形狀;細胞培養2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細胞分離培養48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細胞會出現搏動;心肌細胞為終末分化細胞,在體外不增殖。體外培養的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點,并具有自發性節律搏動,且心肌細胞的培養具有簡便、定量、重復性好以及不受神經體液因素的影響等特點。利用培養的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調節,研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用膠原-胰聯合消化法結合差速貼壁法,并用化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
實驗室分離的經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 組織來源 |
人心肌細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 心臟組織 |
實驗報告:
一、分離與培養: | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; |
硬纖毛蛋白STRC抗體 抑制因子DKK4封閉多肽
英文名稱: Podoplanin CD151封閉多肽
RNA聚合I抗體 整合α7封閉多肽
骨形態發生蛋白2受體抗體 異染色質蛋白1結合蛋白3封閉多肽
真核翻譯起始因子2C1抗體 血管緊張III封閉多肽
組蛋白結合蛋白SLBP抗體 受體活性修飾蛋白2封閉多肽
磷化自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體 鋅指蛋白84封閉多肽
肺表面活性蛋白A抗體 RNA結合蛋白RBP封閉多肽
氮調節因子3樣蛋白抗體 胰島樣生長因子1受體相互作用蛋白1封閉多肽
英文名稱: phospho-NFKB p65 (Ser529) 組蛋白乙酰轉移MORF封閉多肽
死亡因子4樣蛋白2抗體 MEK1/MAPKK1封閉多肽(N-端)
減數分裂缺陷蛋白1抗體 MITF相關轉錄因子封閉多肽
天冬氨酰tRNA連接2抗體 黑色瘤相關抗原3封閉多肽
細胞纖毛內轉運同源蛋白140抗體 ZCCHV蛋白封閉多肽
核心結合因子α1重組兔單克隆抗體 蛋白質單ADP核糖基轉移PARP3封閉多肽
英文名稱: RAB7A N-乙酰轉移8封閉多肽
α1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體 核斑點剪接調控蛋白1封閉多肽
DOCK10蛋白抗體 維甲受體G封閉多肽
人心肌細胞MDA-MB-468 (人乳腺癌細胞) (DMEM) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶
NALM-6 (人B淋巴白血病細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶
兔羊膜上皮細胞5×10?Cells/T25培養瓶
人腦成纖維細胞5×10?Cells/T25培養瓶
A172 (人膠質母細胞瘤細胞) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養瓶
大鼠脾臟單核細胞5×10?Cells/T25培養瓶
小鼠外周血白細胞5×10?Cells/T25培養瓶
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。