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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 大隱靜脈組織 |
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端，經(jīng)內(nèi)踝前方，沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行，經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方，進(jìn)入大腿內(nèi)側(cè)部，與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行，逐漸向前上，在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點(diǎn)稱為隱股點(diǎn)。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時(shí)，須分別結(jié)扎、切斷各屬支，以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈平滑肌細(xì)胞主要功能：①血管平滑肌細(xì)胞的生長(zhǎng)潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素；②參與血管壁的炎癥反應(yīng)，并與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。因此，研究大隱靜脈平滑肌細(xì)胞的代謝和信號(hào)通路是研究大隱靜脈擴(kuò)張等疾病的良好實(shí)驗(yàn)材料。大隱靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
5.方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： | 二、免疫熒光鑒定： |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； |
胸苷激2抗體 AFAP1L2封閉多肽
線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體 Ras樣蛋白A+B封閉多肽
交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian GATA結(jié)合蛋白4封閉多肽
膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體 環(huán)氧化物水解1封閉多肽
絨毛膜癌不表達(dá)蛋白1抗體 溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族37成員A3封閉多肽
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子MAZR抗體 B7-H4封閉多肽
KB抑制蛋白激α/β抗體 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白14封閉多肽
鏈親和抗體 EFCAB5蛋白封閉多肽
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體抗體 G氨基丁A型受體rho2 /GABAA Rρ2封閉多肽
磷化微管相關(guān)蛋白抗體 絲氨甲基化mSHMT封閉多肽
鈉離子通道β1抗體 造血細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白封閉多肽
絲裂原活化蛋白激1/2單克隆抗體 LENG8蛋白封閉多肽
硒蛋白V抗體 干擾誘導(dǎo)蛋白AIM2封閉多肽
PROSC蛋白抗體 CD33封閉多肽
胰腺?gòu)椥?/span>2B抗體 錨蛋白重復(fù)序列與SOCS盒蛋白13封閉多肽
SNX29蛋白抗體 鈣調(diào)蛋白激激β封閉多肽
內(nèi)皮細(xì)胞活化蛋白受體（CD201）抗體 單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5封閉多肽
緊密連接蛋白22抗體 重組人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1
人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B2 英文名稱：(TGFB2)重組蛋白50ug
人腫瘤壞死因子alpha 英文名稱：(TNF-α)重組蛋白10ug
人腫瘤壞死因子alpha 英文名稱：(TNF-α)重組蛋白50ug
人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta英文名稱：(BMPR1B)重組蛋白5ug
人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta英文名稱：(BMPR1B)重組蛋白10ug
人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta英文名稱：(BMPR1B)重組蛋白50ug
人干擾γ（IFNγ）英文名稱：重組蛋白 IFNγ10ug
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