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雞肺動脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 14:19:13瀏覽次數:213

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺動脈組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

雞肺動脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肺動脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經肺門入肺。肺動脈干位于心包內,為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持肺動脈的正常形態;合成和釋放細胞外基質;組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

整合αVβ6抗體 NK細胞抑制性受體2DS3封閉多肽 人抗突變型瓜氨波形蛋白抗體(MCV) ELISA試劑盒

?;Y合結構域蛋白4抗體 γ-氨基丁醛脫氫封閉多肽 人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA) 試劑盒 ELISA

糖原蛋白2抗體 纖溶原激活物抑制因子2/血漿原激活抑制因子-2封閉多肽 人抗突變型瓜氨波形蛋白抗體(MCV) ELISA檢測試劑盒

心血管調節肽Salusin-α抗體 轉錄延伸因子E封閉多肽 人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA) ELISA Kit

溶體絲氨DPP2抗體 磷化整合β4封閉多肽 人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab) ELISA試劑盒

人類乳頭狀瘤病毒33抗體 β淀粉樣蛋白前體蛋白結合蛋白1封閉多肽 人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab) 試劑盒 ELISA

/鈉超極化激活環核苷門控通道蛋白3抗體 角蛋白相關蛋白15.1封閉多肽 人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb) ELISA檢測試劑盒

補體因子H相關蛋白4抗體 HIG1區域家族成員2A封閉多肽 人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab) ELISA Kit

δ-連環蛋白抗體 磷二酯1A封閉多肽 人抗腦組織抗體(ABAb) ELISA試劑盒

磷化G蛋白信號轉導調節因子19抗體 前列腺癌相關蛋白4封閉多肽 人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA) 試劑盒 ELISA

S100鈣結合蛋白A8單克隆抗體 胎盤蛋白14封閉多肽 人抗磷脂酰絲氨抗體(APSA) ELISA檢測試劑盒

英文名稱: MMP9 白介1α封閉多肽 人抗磷壁抗體(TA) ELISA Kit

磷化腫瘤抑制基因P53抗體 半胱胺蛋白-7封閉多肽 人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA) ELISA試劑盒

磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 熱休克蛋白70蛋白4樣蛋白封閉多肽 人抗巨噬細胞抗體(anti-macrophage Ab) 試劑盒 ELISA

溶質載體家族10成員7抗體 膀胱癌相關蛋白BLCAP封閉多肽 人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab) ELISA檢測試劑盒

梅克爾-格魯伯綜合征相關蛋白抗體 角蛋白相關蛋白19.4封閉多肽 人抗紅細胞抗體(RBC) ELISA Kit

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian RNA結合蛋白28封閉多肽 人28S抗核糖體抗體(28S rRNP) ELISA試劑盒

細胞色C氧化17抗體 調亡誘導因子封閉多肽 人抗核仁抗體(ANA) 試劑盒 ELISA
雞肺動脈平滑肌細胞人宮頸成纖維細胞英文名稱:人宮頸成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人宮頸平滑肌細胞英文名稱:人宮頸平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人卵巢囊腫細胞英文名稱:人卵巢囊腫細胞5×105不提供細胞鑒定報告

人宮頸上皮細胞英文名稱:人宮頸上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人睪丸白膜上皮細胞英文名稱:人睪丸白膜上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人睪丸白膜成纖維細胞英文名稱:人睪丸白膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人輸精管平滑肌細胞英文名稱:人輸精管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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