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大鼠羊膜上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:48:44瀏覽次數(shù):280

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 胎盤組織
大鼠羊膜上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶HMC (人腎小球系膜細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠腓腸肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶兔角膜基質(zhì)細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶兔乳腺上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠羊膜上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胎盤組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細(xì)胞,包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì),其光滑,無(wú)血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,均具有多分化潛能,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

核基質(zhì)蛋白21抗體 磷化乳腺癌易感基因1封閉多肽 

核內(nèi)切III樣蛋白1抗體 Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體MRGPRX1+3+4抗體 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX6封閉多肽 

SPRED2蛋白抗體 重組增強(qiáng)型黃色熒光蛋白 

磷化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 轉(zhuǎn)錄因子SP3封閉多肽 

同源盒蛋白HOXA11抗體 線粒體復(fù)合物NDUFS1蛋白封閉多肽 

組蛋白轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白1抗體 磷化神經(jīng)細(xì)胞鳥苷置換因子Ephexin1封閉多肽 

英文名稱: SF3B3 單甲基組蛋白H3(mono methyl K79)封閉多肽 

/鈣調(diào)依賴蛋白激1β/CaMKIβ抗體 納曲酮牛血清白蛋白偶聯(lián)物 

鋅指蛋白257抗體 血管粘附蛋白1封閉多肽 

丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體 重組人巨噬細(xì)胞炎性蛋白MIP-3a蛋白 

X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白2抗體 分選連接蛋白11封閉多肽 

干擾alpha 5蛋白抗體 磷化微管相關(guān)蛋白封閉多肽 

5’-三磷聚核苷抗體 琥珀細(xì)胞色亞基B560封閉多肽 

凋亡抑制因子2抗體 甲基肽受體1封閉多肽 

Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 黑色瘤相關(guān)突變抗原1樣蛋白1封閉多肽 

Pygopus 2蛋白抗體 鋅指蛋白Zic2封閉多肽 

KIAA0427蛋白抗體 磷化原癌蛋白CBL2封閉多肽 
大鼠羊膜上皮細(xì)胞MA-104 [MA 104; MA104] (非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞)(種屬鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

ECV-304 (人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) (T24污染細(xì)胞系,)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MDBK [NBL-1] (牛腎細(xì)胞)(種屬鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠前列腺成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人滑膜成纖維細(xì)胞(類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

RL95-2 (人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)DMEM/F12+5μg/ml Insulin+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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