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大鼠骨髓樹突狀細胞(成熟DC細胞)

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更新時間:2023-04-21 14:55:18瀏覽次數:252

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠骨髓樹突狀細胞(成熟DC細胞)

5×105cells/T25細胞培養瓶

骨髓

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態不規則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成,多數呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節;未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答,不能激活T細胞的第二信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD86免疫熒光鑒定、細胞形態等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  半貼半懸浮

細胞形態  圓形,樹突狀

傳代特性  屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

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實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

PSTK蛋白抗體 微管相關絲氨/蘇氨激3封閉多肽 人銜接活化因子1(APAF1) ELISA試劑盒

肌微管相關蛋白10抗體 DUS2L蛋白封閉多肽 人錨蛋白B(Ank-B)試劑盒 ELISA

果糖-2,6-二磷3/磷果糖激2抗體 血紅蛋白γ2封閉多肽 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA檢測試劑盒

卷曲螺旋結構域蛋白92抗體 線粒體核糖體蛋白L42封閉多肽 人重組激活基因2(RAG-2) ELISA Kit

細胞角蛋白31抗體 活化受體4封閉多肽 人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒

玻璃粘連蛋白抗體 磷化脂肪細胞型脂肪結合蛋白 人NOD樣受體(NLR)試劑盒 ELISA

PARD6G蛋白抗體 核糖體蛋白S8封閉多肽 人視黃誘導基因/RIG-1樣受體(RLR) ELISA檢測試劑盒

FAM59B蛋白抗體 低密度脂蛋白受體的誘導降解蛋白封閉多肽 人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA Kit

英文名稱: Caspase-3 單核細胞趨化蛋白2封閉多肽(小鼠) 人殺菌肽B(CecB) ELISA試劑盒

突觸結合蛋白樣蛋白4抗體 伸長因子結合蛋白封閉多肽 人抗菌肽(Att) 試劑盒 ELISA

軸絲動力蛋白重鏈9抗體 泛激活E1封閉多肽 人顆粒溶(GNLY) ELISA檢測試劑盒

水通道蛋白-7抗體 附睪特異蛋白15封閉多肽 人富組蛋白(HTN5)ELISA Kit

鈣介質抗體 果糖-2,6-二磷3/磷果糖激2封閉多肽 樣轉錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒

體激活因子PA28γ抗體 磷化絲裂原活化蛋白激激8封閉多肽 人絲狀血球凝集(FHA)試劑盒 ELISA

離子型谷氨受體1抗體 磷化孕激受體封閉多肽 人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA檢測試劑盒

心血管發育中胚層相關蛋白1抗體 嗅覺受體52J3封閉多肽 人嗜環蛋白/親環A(CyPA)ELISA Kit

酰基轉移2抗體 CD30封閉多肽 人肌養蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒

雙重特異性磷27抗體 鋅指蛋白313封閉多肽 人膠原凝集(Collectin)試劑盒 ELISA
大鼠骨髓樹突狀細胞(成熟DC細胞)小鼠腎足細胞英文名稱:小鼠腎足細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠輸尿管上皮細胞英文名稱:小鼠輸尿管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠輸尿管平滑肌細胞英文名稱:小鼠輸尿管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠膀胱上皮細胞英文名稱:小鼠膀胱上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠膀胱平滑肌細胞英文名稱:小鼠膀胱平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠膀胱基質成纖維細胞英文名稱:小鼠膀胱基質成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠前列腺上皮細胞英文名稱:小鼠前列腺上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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