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小鼠乳腺成細胞

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更新時間:2023-04-21 14:27:27瀏覽次數:255

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 乳腺組織
小鼠乳腺成纖維細胞的相關產品:CT26.WT小鼠結腸癌細胞專用培養基細胞培養基500MLE0771小鼠髓樣乳腺癌細胞專用培養基細胞培養基125MLE0771小鼠髓樣乳腺癌細胞專用培養基細胞培養基500MLE14小鼠胚胎干細胞專用培養基細胞培養基125MLE14小鼠胚胎干細胞專用培養基細胞培養基500ML

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠乳腺成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

乳腺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自乳腺組織;乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,淺筋膜伸向乳腺組織內形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數可以重復經歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結締組織伸入乳腺組織之間,形成許多間隔,這些纖維結締組織對乳房起固定作用,而纖維結締組織是由成纖維細胞構成的。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

胰腺激抗體 SDR42E1蛋白封閉多肽 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒

信號誘導增殖相關蛋白1抗體 Alexa Fluor 647標記牛血清白蛋白 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯受體激4抗體 鋅指蛋白365封閉多肽 人抗SS-B/La抗體ELISA檢測試劑盒

白細胞介-2單克隆抗體 磷化Ephrin B封閉多肽 人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA Kit

9號染色體開放閱讀框163抗體 Toll樣蛋白受體10封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA試劑盒

富含亮氨重復家庭蛋白4抗體 糖尿病相關同源結構域蛋白SIX5封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)試劑盒 ELISA

多腺苷二磷多聚PARP14抗體 酪氨磷受體相互作用蛋白Liprin α4封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA檢測試劑盒

piwi樣4蛋白抗體 突觸細胞粘附分子1封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA Kit

熱休克蛋白70家族蛋白6抗體 微管蛋白特定伴侶蛋白E封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒

肝癌上調蛋白抗體 配對盒基因8封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯受體GPR158蛋白抗體 葡萄糖轉運蛋白4增強因子封閉多肽 人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA檢測試劑盒

WD重復膜蛋白61抗體 冠狀病毒表面S蛋白封閉多肽 人沙眼衣原體(CT)ELISA Kit

戊型肝炎病毒ORF2抗原抗體 細胞質多聚腺苷結合蛋白3封閉多肽 人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒

黑色瘤分化相關蛋白5抗體 聚合延伸因子封閉多肽 人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)試劑盒 ELISA

線粒體COQ5蛋白抗體 轉錄因子3封閉多肽 人前病毒整合位點1(Pim1)ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白372抗體 乳腺珠蛋白1封閉多肽 人綠膿桿菌外毒A(PEA)ELISA Kit

真核啟動因子2β抗體 FOXL1蛋白封閉多肽 人流感病毒A(FLU A) ELISA試劑盒

囊包蛋白/內披蛋白抗體 HHIP蛋白封閉多肽 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒 ELISA
小鼠乳腺成纖維細胞人毛囊成纖維細胞英文名稱:人毛囊成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人黑色細胞英文名稱:人黑色細胞5×105不提供細胞鑒定報告

人脂肪干細胞英文名稱:人脂肪干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人軟骨細胞英文名稱:人軟骨細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人破骨細胞英文名稱:人破骨細胞5×105提供化學染色報告

人表皮干細胞英文名稱:人表皮干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人橫紋肌細胞英文名稱:人橫紋肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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