實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產品名稱：谷氨酰胺細胞

英文名稱：GlutaMAX-1

貨號：BJ-01X10037

規格：100ml

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，公司產品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

豬環氧合-2受體(COX-2R)聯免疫吸附測定試劑盒 苯佐卡因3-(3,4-二氧苯) 98%氟化鈥(III) 無水,粉末, 99.99% metals basis

豬α1抗胰糜蛋白(α1ACT)聯免疫吸附測定試劑盒 苯佐卡因地布卡因 分析標準品硝鑭 99.9% metals basis

豬周期素D3(CCND3)聯免疫吸附測定試劑盒 卡拉膠地布卡因硫鐿,八水 99.9% REO

豬谷氨脫羧1(GAD1)聯免疫吸附測定試劑盒卡拉膠2-羥丁鈉 97%3-苯酰烯乙酯 94%

豬絲裂原激活蛋白激激活蛋白激3 (MAPKAPK3)聯免疫吸附測定試劑盒卡拉膠3--3-氧雜環丁烷 97%2，3-二巰磺鈉鹽 95%

豬胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)聯免疫吸附測定試劑盒I-卡拉膠鄰苯二酰肼 99%二氧乙酯 97%

豬B活化因子受體(BAFFR)聯免疫吸附測定試劑盒  I-卡拉膠1-苯哌 97%溴代炔 99%

豬低密度脂蛋白受體(LDLR)聯免疫吸附測定試劑盒I-卡拉膠2-吡啶 99%金屬鋰粒 99.9% metals basis

豬突觸素(SYP)聯免疫吸附測定試劑盒K-卡拉膠吡啶-4- 99%碳化鎢 粉末，99.9% metals basis, <10μm

豬T生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)聯免疫吸附測定試劑盒 K-卡拉膠2-吡啶 98%碳化鎢 粉末，99.9% metals basis, ≤1μm

豬白三烯E4(LTE4)聯免疫吸附測定試劑盒 K-卡拉膠鹽丁卡因 99%鈷 99.99%

豬碳酐IX (CA9)聯免疫吸附測定試劑盒乙酰氨二二乙酯硫化銻 98%硫鈷，七水 AR，99.5%

豬B分化因子(BCDF)聯免疫吸附測定試劑盒  乙酰氨二二乙酯乙鋯 Zr, 15.0 - 16.0 %硫鈷，七水 99.99% metals basis

豬內臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制因子(VASPIN)聯免疫吸附測定試劑盒乙酰氨二二乙酯錸粉 99.999%化鈷 99.998% metals basis

豬胎兒血紅蛋白(HBF)聯免疫吸附測定試劑盒  環磷酰錸 99.99%硫鎳，七水 99.99% metals basis

豬甘氨酰tRNA合成(GARS)聯免疫吸附測定試劑盒  環磷酰吡啶-2- 98%鎳粉 99.99% metals basis，200目
谷氨酰胺細胞槐凝集素連翹（標準品）Human, Mouse

兔血管內皮粘附分子1連翹苷（標準品）Human, Mouse, Rat

花生凝集素連翹酯苷A(標準品)Human

人B生長因子連翹酯苷B（標準品）Human, Mouse

兔血纖蛋白原連翹酯苷E(標準品)Human, Mouse, Rat

大鼠凝聚素蓮心（標準品）Human, Mouse, Rat

小鼠抗透明帶抗體蓮心高鹽Human, Mouse

人B分化因子蓮心高鹽（標準品）Human, Mouse, Rat

兔子D二聚體蓮須（標準品）Human, Mouse, Rat