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大鼠胚胎成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 08:36:32瀏覽次數:216

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胚胎組織
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠胚胎成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

胚胎組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養常用的飼養層細胞,能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子,故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優于外源添加的一些因子,而且可以為ES細胞的培養提供類似于體內的微環境,故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

英文名稱: CGA 血管生成受體2封閉多肽 

生長激抗體 胰島生長因子樣家族成員1封閉多肽 

細胞色P450 A43抗體 胞漿環氧化物水解封閉多肽 

21號染色體開放閱讀框70抗體 突觸小泡膜蛋白同源樣蛋白1封閉多肽 

Muellerian繆勒管激抑制因子單克隆抗體 網格蛋白重鏈封閉多肽 

β-半乳糖苷 alpha2-3 唾液轉移抗體 GTP結合蛋白4封閉多肽 

卷曲螺旋結構域蛋白52抗體 β腎上腺能受體激2封閉多肽 

磷化糖原合激3α/β抗體 重組登革熱病毒2型蛋白 

Snail蛋白抗體 磷化肌醇聚磷鹽磷樣蛋白1封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 糖皮質激調節激1封閉多肽 

粘蛋白12抗體 溶質載體家族22成員4封閉多肽 

DNA損傷誘導轉錄蛋白4抗體 腺苷A1A受體封閉多肽 

英文名稱: phospho-BRAF (Thr401) 鋅指蛋白880封閉多肽 

極低密度脂蛋白受體抗體 21號染色體開放閱讀框54封閉多肽 

RNA結合蛋白25抗體 白細胞介17受體E樣蛋白封閉多肽 

CRISPR/Cas9單克隆抗體 黑色瘤相關抗原C2封閉多肽 

富含亮氨重復蛋白20抗體 嗅覺受體5AU12封閉多肽 

kelch樣蛋白13抗體 雌激受體α封閉多肽 
大鼠胚胎成纖維細胞小鼠肝非實質細胞培養基100mL小鼠肝非實質細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠肝非實質細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠肝非實質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肝非實質細胞的體外培養。

大鼠大隱靜脈平滑肌細胞培養基100mL大鼠大隱靜脈平滑肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠大隱靜脈平滑肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠大隱靜脈平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠大隱靜脈平滑肌細胞的體外培養。

NCI-H446 [H446]細胞專用培養基125mL×4NCI-H446 [H446]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持NCI-H446 [H446]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含NCI-H446 [H446]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H446 [H446]細胞的體外培養。

兔角膜上皮細胞培養基100mL兔角膜上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔角膜上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔角膜上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔角膜上皮細胞的體外培養。

人精原干細胞培養基100mL人精原干細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人精原干細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人精原干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人精原干細胞的體外培養。

大鼠肝竇內皮細胞培養基100mL大鼠肝竇內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠肝竇內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠肝竇內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肝竇內皮細胞的體外培養。

W6/32細胞專用培養基125mL×4W6/32細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持W6/32細胞佳的生長狀態。本產品中已包含W6/32細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于W6/32細胞的體外培養。


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