詳細介紹
中文名稱:CFSE細胞增殖與毒性檢測試劑盒
英文名稱:
產品規格:500T
發貨周期:1~3天
熒光染料CFSE(CFDA-SE),是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞。CFSE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料,可以結合細胞內的蛋白質。CFSE在結構上將酚羥基部位改造成AM 體,所以自身不發熒光,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細胞膜,在活細胞內與胞內蛋白共價結合,進入細胞內的CFSE的AM 部位能被細胞內酯酶水解發出綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細胞內蛋白質的氨基部位結合,固定在細胞內,不會漏出細胞外。CFSE 進入細胞后定位于細胞膜、細胞質和細胞核,在細胞核的熒光強。 |
在細胞分裂增殖過程中,CFSE的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強度是親代細胞的一半,根據這一特性,它可被用于檢測細胞增殖,細胞周期的估算及細胞分裂等方面。CFSE標記細胞的熒光非常均一,優于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中,CFSE標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度變為親代細胞的一半,通過流式細胞儀(FL1 通道)根據熒光強度的不同,可檢測出未分裂細胞,分裂一次(1/2的熒光強度),二次(1/4的熒光強度),三次(1/8的熒光強度),以及更多分裂次數的細胞。CFSE可檢測分裂次數多達八次甚至更多。經CFSE標記的細胞可用于體外和體內增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。
CFSE標記的細胞用于體內觀察可以長達數周之久,它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。CFSE 毒性小,不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患。可以更快速,更準確和更安全地得到想要的實驗數據。
CFSE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可以用于成纖維細胞、NK 細胞等其它細胞的增殖檢測。
CFSE標記細胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測時的激發波長可以選擇488nm,此時的發射波長為516nm,使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFSE標記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞增殖外,還可用熒光酶標板定量活細胞數目,或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
儲存條件:CFSE須-20℃避光保存,注意防潮。
有效期:六個月。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
磺地平(標準品)英文名稱: Enrofloxacin CHIC2蛋白抗體包裝25g
(標準品)英文名稱: Enrofloxacin HCL磷化周期檢測點激1抗體包裝5g
,安息香(標準品)英文名稱: Enrofloxacin HCL磷化周期檢測點激2抗體包裝100ml
(標準品)英文名稱: Zolmitriptan磷化周期檢測點激2抗體包裝25ml
硝唑(標準品)英文名稱: Thymosin alpha 1 Acetate磷化周期檢測點激2抗體包裝50MG
硝唑(標準品)英文名稱: Tegafur磷化周期檢測點激2抗體包裝25g
利扎曲普坦(標準品)英文名稱: Tegafur遺傳性脈絡膜缺乏癥相關蛋白抗體包裝5g
鈉(標準品)英文名稱: Acipimox遺傳性脈絡膜缺乏癥相關蛋白樣抗體包裝50MG
乙酯(標準品)英文名稱: Acipimox腺癌標志物CHMP2A抗體包裝1g
噻啶(標準品)英文名稱: Adapalene染色質修飾蛋白CHMP6抗體包裝5g
妥英(標準品)英文名稱: Adapalene染色質修飾蛋白CHMP5抗體包裝100g
妥英鈉(標準品)英文名稱: Adefovir間隙連接蛋白31.1抗體包裝25g
溴馬隆(標準品)英文名稱: Adefovir緊密連接蛋白10抗體包裝100g
扎貝特(標準品)英文名稱: alfacalcidol緊密連接蛋白23抗體包裝1g
扎銨(標準品)英文名稱: PS 48緊密連接蛋白22抗體包裝25g
: GIMSCAU1.048資源名稱: 肺炎克雷伯氏菌 質量規格:HPLC>98%,標準品血管緊張Ⅱ受體2抗體試劑盒柚皮甙二氫查爾酮;Naringin di
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質量規格:>99.0%血管緊張Ⅱ受體2試劑盒血根堿;Sanguinarine
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質量規格:HPLC>98%,標準品血管緊張Ⅱ受體1抗體試劑盒香葉木;Diosmetin
CFSE細胞增殖與毒性檢測試劑盒羊毛脂
其他 無水羊毛脂
英文名稱: Lanolin
其他英文名稱: Lanolin anhydrous;Wool fat
產品規格: CP
包 裝: 500克
CAS號:8006-54-0
級別:CP
熔點:≥39℃
水分:≤0.3%
皂化值:92~106mgKOH/g
灼燒殘渣:≤0.1%
性狀:黃色黏性半固體油脂。微有氣味或幾乎無氣味。幾乎不溶于水,但能與約2倍重量的水混合而不分開,易溶于、二硫化碳、,微溶于冷乙,但更多溶于熱。相對密度0.9242。熔點38~42℃。碘值18~36。閃點>110℃。
用途:生化研究。乳化劑。抗泡劑。防銹劑。緩蝕劑。制藥助劑。化妝品制備。氣相色譜固定液(高使用溫度200℃,溶劑為),分離分析非極性化合物、乙、芳香族及雜環族化合物和揮發油
保存:RT
操作規程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)