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臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒

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更新時間:2022-04-20 11:41:48瀏覽次數(shù):277

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T
貨號 FS-X9659 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅用于科研    
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒公司*的商品:突觸生長相關蛋白抗體一枝黃花(標準品) Chlorhexidine Acatate
NDUFA9蛋白抗體伊貝母(新疆貝母)(標準品) Cyclopenthiazide
間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體乙酰丁香酚 L-Methyldopa
磷化間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體乙酰杠柳寡糖C L-Methyldopa
核仁和紡錘體相關蛋白1抗體

詳細介紹

產品屬于:

中文名稱

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產品規(guī)格

發(fā)貨周期

臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒

Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit

100T

1~3天

商品介紹:

本試劑盒各組分均以無菌形式提供,可直接用于細胞實驗。臺盼藍(Trypan Blue),一種偶氮、親水性酸性藍色染料,可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜,將其染成藍色,而活細胞由于其細胞膜的完整性,可將臺盼藍排斥在外,因此,通過顏色的變化即可將活細胞(活細胞呈透明無色)和死細胞鑒別開來,基于此原理,本品廣泛用于細胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結合形成的復合物可發(fā)出紅色熒光。另外,臺盼藍(合適濃度)還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。

使用方法

1)對于懸浮細胞,離心收集細胞,對其充分清洗后,加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液;對于貼壁細胞,先用胰酶消化細胞,再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。

2)取0.1ml單細胞懸液,按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻,室溫染色3~10min。

【注】:因臺盼藍具有細胞毒性,染色時間過久會導致部分死細胞染色,干擾計數(shù)。通常染色3min即可。

3)取少量上述染色細胞加入血細胞計數(shù),于顯微鏡低倍鏡下計數(shù),分別計算著色細胞(即損傷細胞和死細胞)和總細胞。

【注1】:用移液槍加染色細胞時,沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。

【注2】:1mm2方格內細胞數(shù)通常控制在20-50 cells,當細胞數(shù)超過200個,需重新調整稀釋倍數(shù)。

4)按照以下公式來計算細胞數(shù)目和活細胞百分比,

a,計算每ml細胞數(shù)目:Cells/ml=1mm2大方格內的平均細胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104;【注】:此時的稀釋倍數(shù)為:步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數(shù)

b,總細胞數(shù)目:Total cells=(Cells/ml)×最初制備單細胞懸液的總體積

c,細胞活力值:Viability(%)=(總細胞數(shù)-總著色細胞數(shù))/總細胞數(shù)×100

【注】:通常情況,健康的對數(shù)期培養(yǎng)細胞,活細胞至少占到95%。

儲存條件:室溫,有效期2年
培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

單核細胞趨化蛋白2(MCP2)elisa試劑盒英文名稱:MCP2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體包裝25g

單核細胞趨化蛋白1(MCP1)elisa試劑盒英文名稱:MCP1 ELISA Kit周期B3抗體包裝1g

單氧化A(MAOA)elisa試劑盒英文名稱:MAOA ELISA Kit羧肽X(M14家族2)抗體包裝25g

存活(Surv)elisa試劑盒英文名稱:Surv ELISA Kit上皮鈣粘附分子結合蛋白E7包裝5g

簇集蛋白(CLU)elisa試劑盒英文名稱:CLU ELISA Kit周期D結合蛋白1抗體包裝1g

促胰液(SCT)elisa試劑盒英文名稱:SCT ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白120抗體包裝5g

促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa試劑盒英文名稱:TPPP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白23抗體包裝1g

促泌(SCGN)elisa試劑盒英文名稱:SCGN ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白89抗體包裝25g

刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)elisa試劑盒英文名稱:HHIP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白30抗體包裝5g

次磷核糖基轉移1(HPRT1)elisa試劑盒英文名稱:HPRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白40抗體包裝5mg

雌激受體β(ERβ)elisa試劑盒英文名稱:ERβ ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白114抗體包裝100g

雌激受體α(ERα)elisa試劑盒英文名稱:ERα ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白39抗體包裝25g

垂體腺苷環(huán)化激活肽(ADCYAP1)elisa試劑盒英文名稱:ADCYAP1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白34抗體包裝25g

穿孔1(PRF1)elisa試劑盒英文名稱:PRF1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白75抗體包裝5g

成纖維細胞生長因子受體3(FGFR3)elisa試劑盒英文名稱:FGFR3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白65抗體包裝25g

光硬皮馬勃Scleroderma│cepa Pers. 質量規(guī)格:含量>98.5%,類白色粉末游離三狀腺原試劑盒鹽白屈菜紅堿;Chelerythrin

嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質量規(guī)格:>99%,USP31游離肉堿elisa試劑盒銀杏酚;Ginkgolic acids

豬鏈球菌Streptococcus│suis 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品游離前列腺特異性抗原試劑盒野菊花內酯;Yejunualactone
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒乙二胺四乙二鈉鎂鹽

其他 EDTA二鈉鎂;乙二胺四乙鎂二鈉鹽; (OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基雙[N-(羧基甲基)甘合]](4-)-N,N’,O,O’,O,N,O,N’-鎂(2-)二鈉鹽;EDTA鎂鈉鹽

英文名稱: EDTA-MgNa2

其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid disodium magnesium salt;EDTA magnesium disodium;Magnesium sodium ethylenediaminetetraacetate

產品規(guī)格: CP,98.5%

包裝:100克

CAS號:14402-88-1

C10H12N2Na2MgO8=358.50

級別:CP

含量:98.5~101.0%

澄清度試驗:合格

鐵:≤0.002%

重金屬:≤0.001%

性狀:結晶性粉末。易潮解。溶于水和

用途:生化研究。絡合劑,測定鋼鐵中鎳、絡、錳離子(用于取代滴定)。

保存:RT

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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