詳細介紹
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit | 20次|50次 | 1~3天 |
商品介紹:
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于經過固定和洗滌的細胞或組織,只要經過一步染色反應,洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測到呈現紅色熒光的凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。 |
試劑盒組分:
TdT酶—————————40μl
熒光標記液——————960μl
TdT酶稀釋液(選用)———00μl
細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl
Transferase,TdT)的催化下加上紅色熒光探針Cy3(Cyanine 3)標記的dUTP,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。
TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂,但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區分開,另一方面也不會把射線等誘導發生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
極少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂,此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下,最好同時檢測多個凋亡指標。
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
胃泌素(Gastrin)elisa試劑盒英文名稱:Gastrin ELISA Kit載脂蛋白D抗體包裝5g
胃泌素(GAS)elisa試劑盒英文名稱:GAS ELISA Kit酸敏感離子通道1抗體包裝1g
胃動素(MTL)elisa試劑盒英文名稱:MTL ELISA Kit雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)包裝100ml
胃動素(MOT)elisa試劑盒英文名稱:MOT ELISA Kit髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體包裝25ml
胃蛋白酶(PG)elisa試劑盒英文名稱:PG ELISA Kit腺苷酸環化酶1抗體包裝100g
胃蛋白酶(Pepsin)elisa試劑盒英文名稱:Pepsin ELISA Kit腺瘤樣息肉抗體包裝25g
1(VK1)elisa試劑盒英文名稱:VK1 ELISA Kit溶血磷脂?;D移酶抗體包裝500g
E(VE)elisa試劑盒英文名稱:VE ELISA Kit錨蛋白重復及SAM結構域蛋白3抗體包裝1g
3(VD3)elisa試劑盒英文名稱:VD3 ELISA Kit磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體包裝5g
2(VD2)elisa試劑盒英文名稱:VD2 ELISA Kit酰基脫氫酶很長鏈抗體包裝25g
D(VD)elisa試劑盒英文名稱:VD ELISA Kit信號轉導銜接結合蛋白抗體包裝5g
C(VC)elisa試劑盒英文名稱:VC ELISA Kit錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體包裝1g
6(VB6)elisa試劑盒英文名稱:VB6 ELISA Kit有絲分裂激酶B抗體包裝5g
B12(VB12)elisa試劑盒英文名稱:VB12 ELISA Kit磷酸化Ack1抗體包裝1g
A(VA)elisa試劑盒英文名稱:VA ELISA Kit磷酸化Ack1抗體包裝5g
固酮類還原酶家族7成員A2抗體白介素6(IL6)AZD-5438 是有效的 CDK1/2/9 抑制劑,IC50 值分別為 16 nM/6 nM/20 nM;對GSK3β,CDK5,CDK6的抑制作用較弱。&n
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(紅色熒光)重組水蛭素
其他 重組螞蟥素
英文名稱: Hirudin recombinant
產品規格: BR,95%
包 裝: 20毫克
CAS號:8001-27-2
級別:BR
純度:≥95%
比活性:≥10000 ATU/mg
性狀:凍干粉
用途:生化研究。
保存:-20℃
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。