詳細(xì)介紹
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
CFSE/PI 雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒是利用細(xì)胞熒光染料CFSE(CFDA-SE)和PI對細(xì)胞進(jìn)行染色,利用CFSE標(biāo)記靶細(xì)胞,PI標(biāo)記死的靶細(xì)胞來區(qū)分不同的細(xì)胞,活的靶細(xì)胞成綠色,死的靶細(xì)胞成紅色和綠色,從而檢測細(xì)胞毒性作用。根據(jù)不同的實驗方案設(shè)計,可以用來檢測化合物的細(xì)胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細(xì)胞或NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。 |
CFDA-SE 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞。CFDASE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料,可以結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。CFDASE在結(jié)構(gòu)上將酚羥基部位改造成AM體,所以自身不發(fā)熒光,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的CFDASE的AM 部位能被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解生成CFSE,通過共價結(jié)合賴氨酸側(cè)鏈的氨基而摻入細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞表面的蛋白,且結(jié)合后發(fā)出強的綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基部位結(jié)合,固定在細(xì)胞內(nèi),不會漏出細(xì)胞外。CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,在細(xì)胞核的熒光強。
CFSE毒性小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患。可以更快速,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。
CFSE/PI標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測。
CFSE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm,此時的發(fā)射波長為516nm,使用流式細(xì)胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。PI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光,流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm,此時的發(fā)射波長為647nm,使用流式細(xì)胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。
CFSE標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞毒性外,還可單染后用于細(xì)胞增殖檢測,或者用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
儲存條件:CFSE探針-20℃避光保存;溶解液-20℃保存;PI染色液2-8℃避光保存。
有效期:六個月。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
Vildagliptin(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ifosfamide促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子抗體包裝1g
α-甘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ifosfamide促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子抗體包裝5g
α-對羥基甘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pramipexole 2HCL monohydrate5號染色體開放閱讀框54抗體包裝1g
α-代-β-英文名稱: Pramipexole 2HCL monohydrateCD93抗體包裝5g
α-基吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vinblastine Sulfate嗜粒趨化蛋白CCL6抗體包裝5g
α-三聯(lián)噻吩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vinblastine Sulfate6號染色體開放閱讀框81抗體包裝1g
α-酮戊二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vinblastine Sulfate巨噬炎性蛋白1β抗體包裝1g
β-Estradiol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TemozolomideNK抑制性受體2DL4抗體包裝5g
β-(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TemozolomideNK抑制性受體2DS4抗體包裝1g
β-環(huán)糊精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AminoglutethimideNK抑制性受體3DL1抗體包裝5g
阿達(dá)唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aminoglutethimide7號染色體開放閱讀框46抗體包裝100g
阿達(dá)帕林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flutamide蛋白磷PP2A癌抑制蛋白抗體包裝25g
阿德福韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flutamide巨噬甘露糖受體CD206抗體包裝1g
阿德福韋/阿德福韋酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cyclophosphamide淋巴衍生C-型凝集抗體包裝5g
唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cyclophosphamide5號染色體開放閱讀框60抗體包裝1g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管生成抑制因子試劑盒新對葉百部堿;Neotuberostem
慢生大豆根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格:含量>98.5%,BR血管生成樣蛋白4試劑盒小蕓木;Micromelin
: =ATCC17588=IFO14165=IAM12668資源名稱: 施氏假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR血管生成樣蛋白3試劑盒薟精;Darutigenol
CFSE/PI雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒氧化鉺
其他 氧化鉺(III)
英文名稱: Erbium(III)oxide
其他英文名稱: Erbia;Dierbium trioxide
產(chǎn)品規(guī)格: 3N
包 裝: 5克/25克/100克
CAS號:12061-16-4
Er2O3=382.52
級別:3N
含量:≥99.9%
性狀:粉紅色粉末。易吸收濕氣和二氧化碳。加熱至1300℃時轉(zhuǎn)變?yōu)榱襟w結(jié)晶。不熔融。微溶于礦,不溶于水。相對密度 8.64。有刺激性
用途:生化研究。熒光體活化劑。吸收紅外線的玻璃磁性材料。
保存:RT