詳細介紹
中文名稱:Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒
英文名稱:Calcein-AM/PI Double Stain Kit
產品規格:500T
發貨周期:1~3天
Calcein-AM是一種對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑,發綠色熒光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在傳統的Calcein(鈣黃綠素)基礎上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團,增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后,Calcein-AM(本身不發熒光)被細胞內的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein,從而被滯留在細胞內并發出強綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM細胞毒性極低,是適合用于活細胞染色的熒光探針,而且不會抑制任何的細胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。 |
由于死細胞缺乏酯酶,Calcein-AM僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標記。因此,Calcein-AM常常與死細胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯合使用,同時進行活細胞和死細胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿過活細胞的細胞膜,僅能穿過死細胞膜的無序區域而到達細胞核,并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產生紅色熒光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發,因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用545 nm激發,僅可觀察到死細胞。
本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料,來進行活細胞和死細胞的雙重染色標記,從而進行活細胞和死細胞水平的分析。根據我司優化的實驗體系,單次就200μl細胞懸液進行染色。
注意事項
1)由于Calcein-AM對濕度非常敏感,若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后,必須緊緊密封蓋子。建議根據單次用量,分裝密封保存。Calcein-AM工作液必須現配現用。
2)碘化丙啶(PI)有一定的致癌性,操作時一定要注意防護。若接觸到皮膚,需要立即用自來水清洗。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件:-20℃,有效期12個月
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
谷半胱連接催化亞基(GCLC)elisa試劑盒英文名稱:GCLC ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白11抗體包裝500mg
谷半胱連接(GCLM)elisa試劑盒英文名稱:GCLM ELISA Kit中心體蛋白55kDa抗體包裝5ml
孤啡肽(OFQ)elisa試劑盒英文名稱:OFQ ELISA Kit富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體包裝1g
高鐵血紅蛋白還原(MHBR)elisa試劑盒英文名稱:MHBR ELISA Kit骨架相關蛋白2/腫瘤和微管相關蛋白抗體包裝5g
高遷移率族蛋白1(HMG1)elisa試劑盒英文名稱:HMG1 ELISA Kit染色質修飾蛋白4B(4C)抗體包裝1g
高密度脂蛋白(HDL)elisa試劑盒英文名稱:HDL ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝250mg
高分子量激肽原(HMWK)elisa試劑盒英文名稱:HMWK ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
高爾基蛋白73(GP73)elisa試劑盒英文名稱:GP73 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝5g
干細胞因子受體(SCFR)elisa試劑盒英文名稱:SCFR ELISA Kit酪蛋白激1γ2抗體包裝10MG
干細胞因子(SCF)elisa試劑盒英文名稱:SCF ELISA Kit柯薩奇病蛋白受體B抗體包裝100g
干擾誘導T-細胞α亞族趨化劑(ITαC)elisa試劑盒英文名稱:ITαC ELISA Kit腫瘤抑制因子FBW7抗體包裝25g
干擾調節因子3(IRF3)elisa試劑盒英文名稱:IRF3 ELISA Kit粘附分子4抗體包裝5g
干擾γ誘導單核因子(MIγ)elisa試劑盒英文名稱:MIγ ELISA Kit鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體包裝10g
干擾γ(IFNγ)elisa試劑盒英文名稱:IFNγ ELISA Kit周期依賴性激5激活結合蛋白C53抗體包裝5g
干擾β(IFNβ)elisa試劑盒英文名稱:IFNβ ELISA Kit著絲粒蛋白H抗體包裝1g
中甸隔指孢Dactylella│zhongdianensis 質量規格:>99%,BR載脂蛋白C3試劑盒乙酰蒲公英萜;Taraxeryl ac
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:HPLC>98%,標準品載脂蛋白C2試劑盒異古倫賓;IsocoluMbin
暫未定名Cystofilobasidium│infirmominiatum 質量規格:進分,Sigma C1768載脂蛋白C1試劑盒吲哚;6-Hydroxyindole
Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒乙二胺四乙鐵鈉鹽
其他 EDTA鐵鈉;EDTA一鈉鐵;乙二胺四乙一鈉鐵;(OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基雙[N-(羧基甲基)基乙根]](4-)N,N’,O,O’,O,N,O,N’]鐵(1-)鈉;鐵依地鈉;乙二胺四乙鈉鐵(Ⅲ)鹽
英文名稱: EDTA-FeNa
其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid ferric sodium salt;EDTA ferric sodium salt;Edathamil;EDTA iron(III) sodium salt
產品規格: CP,98.0%
包裝:100克/500克
CAS號:15708-41-5
C10H12N2NaFeO8•3H2O=292.25
級別:CP
含量:≥98.0%
水溶解試驗:合格
氯化物:≤0.1%
性狀:黃色或黃褐色結晶粉末。無毒,加熱至240℃分解。溶于水和,微溶于乙
用途:生化研究。主要用作絡合劑;氧化劑;感光材料沖洗藥品及漂白劑;黑白膠片減薄劑。生化上用于消除由于痕量重金屬引起的催化反應的抑制。植物細胞培養
保存:RT
操作規程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)