培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
高保真KOD試劑盒 |
| 50U/200U/1000U | 1~3天 |
商品介紹:
KOD DNA polymerase 是從克隆有α –型高保真DNA聚合酶的大腸桿菌中分離純化所得,具有3`→5`核酸外切酶活性,保真性能比普通Taq聚合酶高80倍。具有較高的延伸速率,在推薦的條件下大于每分鐘2kb,PCR產(chǎn)物為平端,可與直接接入本公司Blunt平端連接載體中。用于高保真、快速擴(kuò)增目標(biāo)DNA,環(huán)拉法引入點(diǎn)突變,補(bǔ)平DNA粘性末端等。 |
經(jīng)酶切實(shí)驗(yàn)檢測無外源核酸酶污染,PCR方法未檢測到宿主DNA殘留,能夠有效擴(kuò)增大腸桿菌基因組DNA。
酶活定義:
在推薦的緩沖反應(yīng)體系中,以大馬哈魚精DNA為模板,68℃、30min內(nèi)合成10nmol核酸所需要的酶量為一個(gè)活性單位。
保存條件:
儲(chǔ)存溶液為:50mM Tris-HCl(pH7.6),50mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,50%(V/V) glycerol,-20℃存放一年,無明顯活性喪失。冰袋運(yùn)輸 。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
二尼柳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Etodolac8號(hào)染色體開放閱讀框74抗體包裝5g
二甘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Etonogestrel8號(hào)染色體開放閱讀框76抗體包裝1g
二磺拉帕替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Everolimus;RAD0018號(hào)染色體開放閱讀框77抗體包裝250mg
二磺阿米三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluocinolone Acetonide6號(hào)染色體開放閱讀框97抗體包裝5g
二氧芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluocinolone Acetonide補(bǔ)體C7抗體包裝1g
二二氮環(huán)已烷鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flupirtine maleate7號(hào)染色體開放閱讀框10抗體包裝25g
二二異(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flupirtine maleate7號(hào)染色體開放閱讀框45抗體包裝5g
二十,花生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fulvestrant補(bǔ)體C9b抗體包裝1g
二氧六環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gestodene9號(hào)染色體開放閱讀框103抗體包裝5g
二乙酰乙乙二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gestodene9號(hào)染色體開放閱讀框131抗體包裝1g
二乙酰大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexareline9號(hào)染色體開放閱讀框135抗體包裝5g
法羅培南鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iloperidone8號(hào)染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
法莫替丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iloperidone8號(hào)染色體開放閱讀框44抗體包裝25g
反式(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imipenem monohydrate20號(hào)染色體開放閱讀框20抗體包裝5g
泛硫乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imipenem monohydrate4號(hào)染色體開放閱讀框46抗體包裝100g
靈芝Ganoderma│lucidum 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR,醋鹽形式胸腺非依賴性抗原試劑盒西紅花苷I;CrocinⅠ
人型副球菌Paracoccus│homiensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,用于藥理造模胸腺表達(dá)趨化因子試劑盒辛弗林(94-07-5);Synephr
魚腥藍(lán)細(xì)菌Anabaena│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胸腎表達(dá)趨化因子試劑盒五味子酯乙;Schizandrol B
高保真KOD試劑盒鹽羥胺
其他 氯化羥胺;氫氯羥胺;羥基氯化銨;鹽胲;羥基氯化胺;羥胺;羥胺鹽
英文名稱: Hydroxylammonium chloride
其他英文名稱: Hydroxylamine hydrochloride;Oxammonium hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格: AR,98.5%
包裝:100克
CAS號(hào):5470-11-1
H3NO•HC1=69.49
級(jí)別:AR
含量:≥98.5%
pH(50g/L,25℃):2.5~3.5
澄清度試驗(yàn):合格
銨鹽:≤0.1%
硫鹽:≤0.002%
鐵:≤0.0003%
重金屬:≤0.0003%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.01%
性狀:無色結(jié)晶,易受潮并逐漸分解,能溶于水、、三。1g溶于約1ml水(17℃時(shí),83g溶于100ml水)、19ml乙、8ml甲,溶于、甘油和二。0.2mol/L水溶液pH為3.2。半數(shù)致死量(小鼠,經(jīng)口)408mg/kg。有腐蝕性。密度:1.67;熔點(diǎn):155-157℃
用途:生化研究。無機(jī)分析還原劑,絡(luò)合劑,電分析去極劑,脂肪和肥皂的抗氧劑,分析甲醛、樟腦和葡萄糖等,有機(jī)分析檢驗(yàn)醛和酮類,微量分析磺,鋼鐵中鎂成分測定,有機(jī)合成制備肟類。彩色影體洗印。催化劑。溶脹劑。共聚反應(yīng)阻聚劑。
保存:RT,注意防潮