詳細介紹
中文名稱:細胞周期與凋亡檢測試劑盒
英文名稱:
產品規格:50次/200次/500次
發貨周期:1~3天
產品原理:本產品檢測原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析細胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料,其嵌入雙鏈DNA中可以產生熒光,并且熒光的強度和雙鏈DNA的量成正比。 |
在細胞周期中,G0和G1期細胞有一套染色體,G2和M期細胞有兩套染色體,S期介于兩者之間。經過碘化丙啶染色后,處在不同細胞周期中的細胞的熒光強度是不一樣的。假定G0和G1期的細胞熒光強度為1,那么G2和M期的細胞的熒光強度為2,S期的細胞介于1和2之間。
細胞凋亡時,由于細胞核皺縮和DNA片段化,染色時DNA片段會從打孔的細胞膜處丟失,流式細胞儀檢測時,熒光強度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡細胞峰。
細胞凋亡也可以用流式細胞儀觀察細胞光散射的變化來檢測。凋亡前期,染色質皺縮,細胞密度增加,前向角光散色顯著降低。凋亡后期,細胞產生凋亡小體,前向角光散射和側向角光散色都顯著降低。
產品適用:本試劑盒可用于培養的貼壁細胞或者懸浮細胞檢測,也可用于組織細胞檢測。
保存條件:-20°避光條件下,保存1年以上,4°避光條件下,可以保存2個月。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作規程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
對羥基乙酰(標準品)英文名稱: Dolasetron mesylate 8號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
多尼培南(標準品)英文名稱: Doxepin HCl 7號染色體開放閱讀框30抗體包裝5MG
多潘立酮(標準品)英文名稱: Doxepin HCl 7號染色體開放閱讀框57抗體包裝1g
多索茶堿(標準品)英文名稱: Duloxetine hcl7號染色體開放閱讀框36抗體包裝1g
多效唑(標準品)英文名稱: Duloxetine hcl7號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
鵝去氧膽(標準品)英文名稱: Dutasteride7號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
厄貝沙坦(標準品)英文名稱: Dutasteride7號染色體開放閱讀框44抗體包裝1g
厄多司坦(標準品)英文名稱: Edaravone8號染色體開放閱讀框40抗體包裝5g
恩諾沙星(標準品)英文名稱: Edaravone8號染色體開放閱讀框37抗體包裝1g
恩曲他濱(標準品)英文名稱: Hydroquinidine8號染色體開放閱讀框45抗體包裝10g
恩替卡韋(標準品)英文名稱: Epinastine HCl8號染色體開放閱讀框80抗體包裝50g
二基-(2-)(標準品)英文名稱: Epinastine HCl9號染色體開放閱讀框3抗體包裝1g
二基-(2-)(克霉唑雜質I,標準品)英文名稱: Eplerenone8號染色體開放閱讀框47抗體包裝250mg
二酮(標準品)英文名稱: Eplerenone8號染色體開放閱讀框48抗體包裝25ml
二倍他米松(標準品)英文名稱: Etodolac8號染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>98%胸腺嘧啶核苷磷化試劑盒喜樹堿;Camptothecine
鮮綠青霉Penicillium│viridicatum 質量規格:≥580IU/ mg,BR胸腺基質淋巴生成試劑盒新橙皮苷二氫查爾酮;Neosperidi
淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus 質量規格:含量測定胸腺活化調節趨化因子試劑盒西紅花苷II;Crocin II
細胞周期與凋亡檢測試劑盒鹽三乙胺
其他 三乙胺鹽鹽;2,2',2''-次氮基三乙鹽鹽
英文名稱: Triethanolamine hydrochloride
其他英文名稱: Tri(hydroxyethyl)amine hydrochloride;2,2′,2″-Trihydro- xytriethylaminehydrochloride
產品規格: CP,99%
包裝:100克
CAS號:637-39-8
C6H15NO3•HC1=185.65
級別:CP
含量:≥99.0%
熔點:177~188℃
溶解性試驗:合格
性狀:結晶。有吸濕性。易溶于水,極微溶于乙
用途:生化研究。測量錫和銻。軟化劑。合成樹脂。
保存:RT,避光