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ADPG焦磷酸化酶(AGP)紫外分光光度法

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更新時(shí)間:2022-03-10 14:49:29瀏覽次數(shù):483

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) YS-01S6741 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供于科研使用    
ADPG焦磷酸化酶(AGP)紫外分光光度法公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:KLF1小鼠Kruppel樣因子1ELISA方法
KL小鼠Klotho蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒
KLβ小鼠Klothoβ蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒
Ki67P小鼠Ki-67蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒
JUNB小鼠Jun小鼠B原癌基因ELISA方法

詳細(xì)介紹

圖片1.png

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

ADPG焦磷酸化酶(AGP)紫外分光光度法

50管/48樣

紫外分光光度法

YS-01S6741

商品介紹:

公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定意義
AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應(yīng)生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。

測(cè)定原理

AGP催化的逆向反應(yīng)生成G1P,在反應(yīng)體系中添加的磷酸己糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下測(cè)定NADPH增加速率,即可計(jì)算AGP活性。

需自備的的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測(cè)。

2. 細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血液可直接測(cè)定,或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。

測(cè)定步驟:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。

3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 對(duì)照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

6. 測(cè)定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

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