低溫存法:
① 簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
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培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
基本概念:
(1) 菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
菌種具有兩大功能:
( 1 )公司產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)灌根可有效防治植物細(xì)菌性和真菌性土傳病害,同時(shí)可使植物葉部的細(xì)菌和真菌病害明顯減少;
( 2 )對(duì)植物具有明顯的促生長(zhǎng)、增產(chǎn)作用。 多粘類芽孢桿菌對(duì)細(xì)菌性土傳病害 ―― 植物青枯病具有很好的防治效果,在收獲后期,對(duì)番茄、茄子、辣椒、煙草、馬鈴薯、羅漢果和生姜青枯病(姜瘟病)的田間防效可達(dá) 70 ~ -- %,最高增產(chǎn)率達(dá) 493 %,甚至當(dāng)對(duì)照發(fā)病率高達(dá) -- %時(shí)防效也是如此。 多粘類 芽孢桿菌 對(duì)芋頭軟腐病、大白菜軟腐病、辣椒 根腐病 、花卉根腐病、玉竹根腐病、沙參根腐病、番茄猝倒病、番茄立枯病以及辣椒疫病等土傳 病害 也具有較好的防治作用。 此外,多粘類芽孢桿菌對(duì) 植物 具有明顯的促生長(zhǎng)作用,可使田間植株高度比空白對(duì)照區(qū)增加 10-30cm ;甚至在植物不發(fā)青枯病時(shí),也可使植物的產(chǎn)量增加 27.5% ,且增產(chǎn)主要表現(xiàn)為收獲前期。
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