豬載脂蛋白B100(apo-B100)酶聯免疫試劑盒ELISA的操作要點?
優質的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條
件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。
本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試
劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規定操作，必能得出
準確的結果。

豬載脂蛋白B100(apo-B100)酶聯免疫試劑盒⑴標本的采取和保存
可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物
（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假
陽性反應。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。
⑵ 試劑的準備
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包
括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出
的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰
箱保存。
⑶加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物
加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。
⑷保溫
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。
⑸洗滌
可分為浸泡式和流水沖洗式兩種洗滌方式。
⑹顯色和比色
?顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應
的溫度和時間仍是影響顯色的因素。
?比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標比色儀的比
色架中。以軟板為載體的試驗，需先將板置于標準96孔的座架中，才可進行比色。
?酶標比色儀
簡稱酶標儀，通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。
⑺結果判斷
①定性測定
a．間接法和夾心法
陽性判定值；標本/陰性對照比值。
b. 競爭法
陽性判定值法；抑制率法。
②定量測定

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MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-Annexin IV 膜粘連蛋白 A4抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Bcl-2(Ser70) 磷酸化Bcl-2抗體 規格 0.1ml

Streptavidin-HRP 0.1ml 進口分裝

VAMP8 英文名稱： 囊泡相關膜蛋白8抗體 0.1ml

D-DIMER 英文名稱： 交聯纖維蛋白二聚體抗體 0.2ml

Anti-Annexin IV 膜粘連蛋白 A4抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml
豬載脂蛋白B100(apo-B100)酶聯免疫試劑盒Anti-phospho-P53 (Thr81)/FITC 熒光素標記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rabbit Anti-dog IgG/Biotin 生物素化兔抗狗IgGMulti-class antibodies規格： 0.3ml

環子孢子蛋白抗體 anti-CSP 1ml

Rabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

phospho-FGFR3 (Tyr724) 英文名稱： 磷酸化成纖維細胞生長因子受體3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-YWHAE(Thr232) 磷酸化14-3-3E蛋白抗體 規格 0.1ml

Rabbit Anti-dog IgG/Biotin 生物素化兔抗狗IgGMulti-class antibodies規格： 0.3ml