豬熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫試劑盒ELISA的操作要點?
優質的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條
件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。
本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試
劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規定操作，必能得出
準確的結果。

豬熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫試劑盒⑴標本的采取和保存
可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物
（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假
陽性反應。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。
⑵ 試劑的準備
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包
括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出
的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰
箱保存。
⑶加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物
加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。
⑷保溫
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。
⑸洗滌
可分為浸泡式和流水沖洗式兩種洗滌方式。
⑹顯色和比色
?顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應
的溫度和時間仍是影響顯色的因素。
?比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標比色儀的比
色架中。以軟板為載體的試驗，需先將板置于標準96孔的座架中，才可進行比色。
?酶標比色儀
簡稱酶標儀，通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。
⑺結果判斷
①定性測定
a．間接法和夾心法
陽性判定值；標本/陰性對照比值。
b. 競爭法
陽性判定值法；抑制率法。
②定量測定

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NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 鈉離子/磺膽酸共轉運蛋白抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-phospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATF2 (Thr55) 磷酸化活化復制因子2抗體 規格 0.1ml

Tr K B 濃縮液 0.1ml 進口分裝

UTS2D 英文名稱： 尾加壓素2相關肽抗體 0.2ml

DISP2 英文名稱： 轉運蛋白DISP2抗體 0.2ml

Anti-phospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml
豬熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫試劑盒Anti-phospho-P53 (Ser9)/FITC 熒光素標記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Biotin 生物素化兔抗雞IgGMulti-class antibodies規格： 0.1ml

磷酸化環腺苷酸應答元件結合蛋白抗體 Anti-P-CREB-1 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

Filensin 英文名稱： 串珠狀纖維結構蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Zap-70(Tyr493) 磷酸化zeta相關蛋白70抗體 規格 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Biotin 生物素化兔抗雞IgGMulti-class antibodies規格： 0.1ml