詳細介紹
猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A價格
形態特性 上皮細胞
品牌 貼壁生長
特征特性 這個細胞株在早期自發轉化并已傳代540次以上。 電鏡下觀察到Weibel-Palade顆粒。 高代次的細胞用作滋養層以增強貼壁,轉接能力和供養眼色素層黑素細胞。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A價格貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-GM-CSF/FITC 熒光素標記粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-P2Y4 receptor/P2ry4 /FITC 熒光素標記P2Y4受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BFAR/RNF47 環指蛋白47抗體 規格 0.2ml
CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質激素釋放因子 0.5mg
HDAC9 英文名稱: 組蛋白去乙酰化酶9抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RASSF1A Ras相關區域家族1A抗體 規格 0.1ml
Anti-P2Y4 receptor/P2ry4 /FITC 熒光素標記P2Y4受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Integrin alpha 1 整合素α1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-Adiponectin receptor 2 脂聯素受體2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-cdc25A (Ser177) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 規格 0.1ml
蘇木精染色液-藍色 12ml/500ml 配合AEC,DAB,BCIP/NBT,Fast Red使用
VEGFR3 英文名稱: 血管內皮細胞生長因子受體3抗體 0.1ml
DUSP10 英文名稱: 雙特異性蛋白磷酸酶10抗體 0.2ml
Anti-Adiponectin receptor 2 脂聯素受體2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
FBXO24 英文名稱: FBXO24蛋白抗體 0.2ml
食道癌相關基因抗體 Anti-ECG2 0.1ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 熒光素標記磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TH (Ser31) 磷酸化酪氨酸羥化酶抗體 規格 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/FITC 熒光素標記兔抗馬IgGMulti-class antibodies規格: 0.3ml
猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A價格Anti-ADRA2/FITC 熒光素標記alpha-2腎上腺素能受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-EPOR/FITC 熒光素標記紅細胞生成素受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CREM 環磷酸腺苷反應元件調節蛋白抗體 規格 0.1ml
EGF protein (Active) 重組人表皮生長因子 100ug
KRG2 英文名稱: 角質細胞生長因子調節蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ULBP2/N2DL2 UL16結合蛋白2抗體 規格 0.2ml
Anti-EPOR/FITC 熒光素標記紅細胞生成素受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml