詳細介紹
大額牛肺細胞;BFR-L1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 大額牛肺細胞;BFR-L1價格
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性新生大額牛的肺組織。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養條件 M-199:
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 胎牛血清 15%
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-DRADA/ADAR1/FITC 熒光素標記雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC 熒光素標記磷酸化雙微體2癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CA III/Carbonic anhydrase 3 碳酸酐酶3抗體 規格 0.2ml
CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mg
HCN2 + HCN4 英文名稱: 環化核苷酸調控陽離子通道蛋白亞型2/4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SDHD 線粒體琥珀酸脫氫酶D抗體 規格 0.2ml
Anti-Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC 熒光素標記磷酸化雙微體2癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Irna(Human Immune RNA) ELISA Kit 人免疫核糖核酸Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-phospho-FSCN1(Ser39) 磷酸化纖維束蛋白同源物1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (Di Methyl K4) 二甲基化組蛋白H3K4抗體 規格 0.1ml
SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信號識別顆粒抗體 96T
recPEP 英文名稱: 重組豬乙腦病毒結構蛋白抗體 0.1ml
COMMD3 英文名稱: 銅代謝結構域蛋白3抗體 0.2ml
Anti-phospho-FSCN1(Ser39) 磷酸化纖維束蛋白同源物1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rabbit Anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG 1mg
FRMD5 英文名稱: FRMD5蛋白抗體 0.2ml
戊型肝炎病毒抗體 Anti-HEV 0.1ml
Anti-Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641)/FITC 熒光素標記磷酸化蛋白激酶C α/β2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPH3AL(Ser234) 磷酸化Ras相關GTP結合蛋白抗體 規格 0.1ml
Guinea IgG (親和純化) 豚鼠IgGMulti-class antibodies規格: 10mg
Col IV (Mouse Collagen Type IV ) ELISA KIT 小鼠Ⅳ型膠原Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CD19/PE 熒光素PE標記CD19抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E1 glycoprotein 風疹病毒糖蛋白抗體 規格 0.2ml
EB-VCA IgG EB 病毒 IgG(間接法二步法)
MTCP1 英文名稱: 成熟T淋巴細胞增殖蛋白1抗體 0.2ml
ALAS-E 英文名稱: 5-基乙酰丙酸合酶1抗體 0.2ml
Anti-CD19/PE 熒光素PE標記CD19抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml