詳細介紹
新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF價格
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 北京眼科研究所建系細胞。
培養條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-fgl2/FITC 熒光素標記凝血酶原酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100/FITC 熒光素標記細胞核因子/k基因結合核因子 p52/p100抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BZW2 BZW2蛋白抗體 規格 0.2ml
B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配體1(多肽) 0.5mg
HCG3 英文名稱: HCG3蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RNF130/ 環指蛋白130抗體 規格 0.2ml
Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100/FITC 熒光素標記細胞核因子/k基因結合核因子 p52/p100抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit 大鼠c-Jun氨基末端激酶Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-STAT4 信號轉導和轉錄激活因子4抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Bio 生物素標記的羊抗人IgG 規格 0.1ml
Tn- I ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ 96T
NMDA epsilon 2 英文名稱: 谷酸受體NMDAζ2抗體 0.2ml
phospho-B-Raf (Thr401) 英文名稱: 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
Anti-STAT4 信號轉導和轉錄激活因子4抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗水貂IgG 0.1ml
GDI1 英文名稱: 精神發育遲滯相關蛋白Rab GDI α抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARF6 ADP核糖基化因子6抗體 規格 0.2ml
Anti-IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、豬、、羊、犬白介素-1受體拮抗劑抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Mink IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗水貂IgG 規格 0.1ml
Anti-PP-2A/FITC 熒光素標記蛋白質磷酸酶-2A抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
CCK(Human cholecystokinin) ELISA Kit 人膽囊收縮素/腸促胰酶肽Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-ICOS/CD278 誘導協同刺激分子CD278抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAP7D1/RPRC1 精氨酸/脯氨酸富含卷曲蛋白1抗體 規格 0.2ml
EAR2(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2)ELISA Kit 人嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員2 96T
RFTN2 英文名稱: RFTN2蛋白抗體 0.2ml
CEBP-alpha 英文名稱: 轉錄調節因子C/EBP α 抗體 0.1ml
Anti-ICOS/CD278 誘導協同刺激分子CD278抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml