詳細介紹
細胞名稱 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC培養
形態特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性
培養條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代,3~4天換液1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:11;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:19,23;D3S1358:15,17;D5S818:12;D7S820:10,12;D8S1179:12,14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:10,11;vWA:15,17;
同工酶
染色體
使用權限 B類
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標記抑素抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
CBP(CREB-binding protein) CREB結合蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體 Anti-phospho-CaMK2a 0.1ml
SDHA 英文名稱: 琥珀酸脫氫酶復合體亞基A抗體 0.1ml
E.coli DH-5 Alpha 英文名稱: DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化熱休克蛋白27抗體 規格 0.1ml
CBP(CREB-binding protein) CREB結合蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit 人特異性抗原Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-HHV8/ORF K2 人類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MFGE8/BA46 上皮細胞抗原BA46抗體 規格 0.2ml
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳酸脫氫酶 96T
RNF211 英文名稱: 環指蛋白211抗體 0.2ml
CYP51A1 英文名稱: 羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗體 0.2ml
Anti-HHV8/ORF K2 人類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
人BMX非受體絡氨酸激酶(BMX)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)ELISA試劑盒,英文名:P-PKB ELISA Kit人白介素4受體(IL4R/CD124)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白介素21(IL21)ELISA試劑盒,英文名:IL21 ELISA Kit人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠CD14分子(CD14)ELISA試劑盒,英文名:CD14 ELISA Kit人白細胞免疫球蛋白樣受體亞科B成員1(LILRB1)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒,英文名:PROGR ELISA Kit人CDK活化激酶裝配因子MAT1(MNAT1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒,英文名:PAP ELISA Kit人肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒,英文名:Hsp-60 ELISA Kit人NAD(P)H脫氫酶醌1(NAD(P)H dehydrogenase [quinone] 1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒,英文名:B7-2/sCD86 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Complement component C9小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒,英文名:TIMP-3 ELISA Kit人 2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠胱抑素SA(CST2)ELISA試劑盒,英文名:CST2 ELISA Kit人PDZ和LIM域蛋白1(PDZ and LIM domain protein 1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠促甲狀腺激素(TSH)ELISA試劑盒,英文名:TSH ELISA Kit人催乳素(PRL)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠Toll樣受體4(TLR-4)ELISA試劑盒,英文名:TLR-4 ELISA Kit人絡絲蛋白(Reelin)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠組蛋白乙酰基轉移酶1(HAT1)ELISA試劑盒,英文名:HAT1 ELISA Kit人血清反應因子(SRF)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠纖維蛋白原α(FGα)ELISA試劑盒,英文名:FGα ELISA Kit人克拉拉細胞磷脂結合蛋白(CC10)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)ELISA試劑盒,英文名:CXCL16 ELISA Kit
抗體稀釋液 10ml/100ml pH7.2
Versican 英文名稱: 蛋白聚糖Versican抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 規格 0.1ml
Laminin Beta1 peptide 層粘連蛋白β1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
phospho-DOK1(Tyr362) 英文名稱: 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白1抗體 0.1ml
Anti-phospho-ALK/CD246 (Tyr1604) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人紐蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HPR 結合珠蛋白相關蛋白抗體 規格 0.2ml
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿 96T
Phospho-PKR (Thr446 + Thr451) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶R抗體 0.1ml
Cryptochrome 1 英文名稱: 隱花色素蛋白1抗體 0.2ml
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml