詳細介紹
細胞名稱 人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1培養
形態特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞是從一名12歲的白人女性卵巢畸胎瘤患者的腹腔積液中分離建立的;該細胞可以形成緊密的編織狀的克隆,在低血清培養、低密度接種或用5-bromo-2'-deoxyuridine處理時可以分化為胚狀體。該細胞表達胚胎抗原PCC4,但未檢測到F9的表達。
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:4~1:10傳代;每周2~3次?!?/span>
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,12;D13S317:9,10;D16S539:9,12;D18S51:15,18;D19S433:13;D21S11:29,31.2;D2S1338:24;D3S1358:15;D5S818:11;D7S820:9;D8S1179:14,15;FGA:24;TH01:7,9;TPOX:11;vWA:15,17;
同工酶
染色體 40~46,XX
使用權限 A類
人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-TRF/Gold 金離子標記抗轉鐵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.5ml(15nm)
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重組人表皮生長因子Multi-class antibodies規格: 100ug
β-抑制蛋白2抗體 Anti-β-arrestin 2 0.1ml
ZNF93 英文名稱: 鋅指蛋白93抗體 0.2ml
DNAH9 英文名稱: 軸絲動力蛋白重鏈9抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷酸化4E結合蛋白1抗體 規格 0.1ml
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重組人表皮生長因子Multi-class antibodies規格: 100ug
TXB2 (Rabbit Thromboxane B2) ELISA Kit 兔血栓素B2Multi-class antibodies規格: 96T
Anti-CYP450/FITC 熒光素標記細胞色素P450單氧化酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DACH1 細胞命運決定因子DACH1抗體 規格 0.2ml
Rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記兔IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
lysozyme 英文名稱: 溶菌酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ZNF693/CASZ1 鋅指蛋白693抗體 規格 0.2ml
Anti-CYP450/FITC 熒光素標記細胞色素P450單氧化酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
人ω-3脂肪酸受體1(O3FAR1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒,英文名:Tn-T ELISA KiISA Kit for Human Apelin-13小鼠胃泌素(Gastrin)ELISA試劑盒,英文名:Gastrin ELISA KiISA Kit for Human Arylsulfatase A小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒,英文名:FⅨ ELISA KiISA Kit for Human Contactin-1小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒,英文名:PTH ELISA KiISA Kit for Human Calponin-1小鼠膽固醇(CH)ELISA試劑盒,英文名:CH ELISA KiISA Kit for Human Early activation antigen CD69小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒,英文名:IFN-α ELISA KiISA Kit for Human Caveolin-1小鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA試劑盒,英文名:MCP-1/CCL2 ELISA Kit
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶PP1-α催化亞基(PP-1A)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒,英文名:FⅧAg ELISA KiISA Kit for Human Deoxyuridine 5'-triphosphate nucleotidohydrolase, mitochondrial小鼠抑制素βA(INHβA)ELISA試劑盒,英文名:INHβA ELISA KiISA Kit for Folic acid小鼠天冬酰胺合成酶(ASNS)ELISA試劑盒,英文名:ASNS ELISA KiISA Kit for Human Fibulin-1小鼠凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)ELISA試劑盒,英文名:F13B ELISA KiISA Kit for Human Glutaredoxin-3小鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒,英文名:MYH1 ELISA KiISA Kit for Human Hemojuvelin小鼠多巴胺受體D1(DRD1)ELISA試劑盒,英文名:DRD1 ELISA Kit人孤啡肽受體(Nociceptin receptor)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒,英文名:ACV-RAb ELISA Kit
品名 規格 備注
VCAM1 英文名稱: 血管內皮細胞粘附分子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Bid(Ser61) 磷酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體 規格 0.1ml
MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DUSP22 英文名稱: 雙特異性磷酸酶22抗體 0.2ml
Anti-beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Ep-CAM/CD362(Human Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人上皮細胞粘附分子Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/PE PE標記的小鼠抗人IgG 規格 0.1ml
ABCG2(Human ATP-binding cassette transporter G2) ELISA Kit 人腺苷三磷酸結合盒轉運體G2 96T
sFRP-4 英文名稱: 子宮內膜抗體 0.1ml
Cpt1c 英文名稱: 腦型肉堿棕櫚酰轉移酶1C抗體 0.2ml
Anti-phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml