詳細介紹
細胞名稱 人胚肺轉化細胞;SL-1培養
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
人胚肺轉化細胞;SL-1培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit 人α平滑肌肌動蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-p58ipk p58ipk抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HSD3a 羥基類固醇脫氫酶3α抗體 規格 0.2ml
ACA(Human anti-centrol and centrosome antibody) ELISA Kit 人抗中性粒/中心體抗體 96T
Cerebral protein 4 英文名稱: 腦蛋白4抗體 0.2ml
CUG-BP1 英文名稱: 胞苷尿苷鳥苷結合蛋白1抗體 0.2ml
Anti-p58ipk p58ipk抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
VB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit 人維生素B12Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤生長因子抗體(小鼠、大鼠、豬)Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Hes5 發狀分裂相關增強子-5抗體 規格 0.2ml
ACA-IgG(Mouse anti-cardiolipin antibody IgG) ELISA Kit 小鼠抗心磷脂抗體IgG 96T
PON3 英文名稱: 對氧磷酶3抗體 0.2ml
CYP2S1 英文名稱: 細胞色素p450 2s1抗體 0.1ml
Anti-PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤生長因子抗體(小鼠、大鼠、豬)Multi-class antibodies規格: 0.2ml
人胱天蛋白酶9(Caspase-9/MCH6/ICE-LAP6)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒,英文名:Col Ⅱ ELISA Kit人ATP敏感的內向整流鉀通道10(KCNJ10)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒,英文名:5-HIAA ELISA Kit人層粘連蛋白β2(LAMβ2)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠胰蛋白酶原酶(Try)ELISA試劑盒,英文名:Try ELISA Kit人線粒體Poly(A)核糖核酸聚合酶(PAP)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒,英文名:DHEA-S7 ELISA Kit人髓磷脂少突膠質細胞糖蛋白(MOG)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒,英文名:FⅡ ELISA Kit人神經降壓素/神經調節肽N(Neurotensin/neuromedin N)ELISA試劑盒人96T1.56-100 pmol/L大鼠緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒,英文名:ZO1 ELISA Kit人表角質蛋白(Periaxin)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠高半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒,英文名:Hcy ELISA Kit
人雙鏈核糖核酸特異腺苷脫氨酶(DSRAD)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠轉化生長因子β受體Ⅰ(TGFβR1)ELISA試劑盒,英文名:TGFβR1 ELISA Kit人過氧化還原酶6(PRDX6) ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠白細胞抗原DR(HLA-DR)ELISA試劑盒,英文名:HLA-DR ELISA Kit人前蛋白轉化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠CD45分子(CD45)ELISA試劑盒,英文名:CD45 ELISA Kit人肺表面活性物質相關蛋白質D( PSP-D)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒,英文名:MUC1 ELISA Kit人突觸素(Synaptophysin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠頭蛋白(NOG)ELISA試劑盒,英文名:NOG ELISA Kit人鞘氨醇1磷酸酯受體2(S1PR2)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠內皮素受體B(ETRB)ELISA試劑盒,英文名:ETRB ELISA Kit人髓系細胞觸發受體樣轉錄因子1(TREML1/TLT-1)ELISA試劑盒人96T62.5-4000 pg/mL大鼠核連蛋白2(NUCB2)ELISA試劑盒,英文名:NUCB2 ELISA Kit
山羊抗豬 IgG(H+L)/HRP 0.1ml 美國Jackson公司分裝
VEGFB 英文名稱: 血管內皮生長因子B 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 規格 0.1ml
Nm23(NDP Kinase A,NDPKA) 轉移抑制基因抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DBX2 英文名稱: 腦發育同源蛋白2抗體 0.2ml
Anti-phospho-APP/ABPP(Thr668) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶11Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Nanog 胚胎干細胞關鍵蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-7Ra/CD127 白細胞介素-7受體a抗體 規格 0.2ml
5-NT ELISA Kit 大鼠5核苷酸酶 96T
PKA alpha + beta 英文名稱: 蛋白激酶A抗體 0.1ml
C1orf86 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框86抗體 0.2ml
Anti-Nanog 胚胎干細胞關鍵蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml