詳細介紹
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞;IMR-90培養
形態特性 成纖維細胞
品牌 貼壁生長
特征特性 W.W. Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材,建立了人二倍體成纖維細胞株IMR-90。 [22381] 分裂潛能,病毒感受性和其它性質都得到了充分研究,因而這株細胞可以作為WI-38或其它標準人肺細胞株的替代株。 有報道稱這株細胞在表現出衰老前可倍增58次。 [22381]
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況 P(11+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人胚肺成纖維細胞;IMR-90培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-p-Nrf2/FITC 熒光素標記磷酸化核因子2相關因子2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-CD8/PE 熒光素藻紅蛋白標記兔抗人、大、小鼠CD8抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
CD25/白介素2-受體抗體 Anti-CD25/IL-2RA 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgM/RBITC 羅丹明標記的羊抗小鼠IgM 0.3ml
AFF2 英文名稱: 脆性X綜合征相關蛋白AFF2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PLGLB2 纖溶酶相關蛋白B2抗體 規格 0.2ml
Anti-CD8/PE 熒光素藻紅蛋白標記兔抗人、大、小鼠CD8抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-GAPDH 兔抗3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內參抗體)Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser296) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規格 0.1ml
兔抗猴IgG純化抗體 1mg/10mg 國產
Phospho-YB1(Ser102) 英文名稱: 磷酸化DNA結合蛋白B抗體 0.1ml
DPY19L1 英文名稱: 短粗矮胖19蛋白樣1抗體 0.2ml
Anti-GAPDH 兔抗3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內參抗體)Multi-class antibodies規格: 0.1ml
人纖維膠凝蛋白2(FCN2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠神經型一氧化氮合酶()ELISA試劑盒,英文名: ELISA KiISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 18大鼠轉化生長因子β激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒,英文名:TSC22 ELISA Kit人氧鯊烯環化酶(OSC)ELISA試劑盒人96T0.312-20 nmol/mL大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒,英文名:PI ELISA KiISA Kit for Human Major facilitator superfamily domain-containing protein 2A大鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)ELISA試劑盒,英文名:cTn-T ELISA Kit人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶1(MASP1)ELISA試劑盒人96T1.56-100 U/L大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒,英文名:MPO ELISA KiISA Kit for Human Promotilin大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒,英文名:GIP ELISA Kit人神經纖維介質多肽(NF-M)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒,英文名:sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Fibroblast growth factor 6小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA試劑盒,英文名:uPAR ELISA KiISA Kit for Human Necdin大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒,英文名:SDF-1β/CXCL12 ELISA Kit人N乙酰胞壁酸L酰胺酶 ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠谷氨酸脫羧酶1(GAD1)ELISA試劑盒,英文名:GAD1 ELISA KiISA Kit for Human Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1大鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒,英文名:Big ET ELISA KiISA Kit for Human Proteoglycan 4大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒,英文名:α-SMA ELISA KiISA Kit for Human Regulator of G-protein signaling 19大鼠白細胞介素13(IL-13)ELISA試劑盒,英文名:IL-13 ELISA KiISA Kit for Human Protein S100-A*鼠心肌營養素1(CT1)ELISA試劑盒,英文名:CT1 ELISA Kit
羊抗IgG血清 0.5ml 國產
CCBR1 英文名稱: 鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-c-Kit(Tyr703) 磷酸化原癌基因c-kit抗體 規格 0.1ml
HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去乙?;?抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DVL3 英文名稱: DVL3蛋白抗體 0.2ml
Anti-5-HTT 5-羥色胺轉運蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit 大鼠成纖維細胞生長因子10Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Stanniocalcin 1 斯鈣素抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgG 規格 0.1ml
15-LO/LOX ELISA Kit 大鼠15脂加氧酶 96T
Nidogen2 英文名稱: 骨巢蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Bcl-2(Thr129) 英文名稱: 磷酸化Bcl-2抗體 0.1ml
Anti-Stanniocalcin 1 斯鈣素抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml