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產(chǎn)品名稱:TM4(正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號:YS-02X9962
產(chǎn)品分類:細(xì)胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準(zhǔn)備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
小鼠白介素32(IL-32)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠雙調(diào)蛋白(AR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠乳酸脫氫(LDH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠腎損傷分子1(KIM-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠層粘蛋白(LN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠瘦素受體(LEPR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠白三烯C4(LTC4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠脂蛋白脂(LPL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
TM4(正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞)16290-07-6-7- 規(guī)格: 10mg
紫花前胡 規(guī)格: 20mg
59227-89-3月桂氮卓 規(guī)格: HPLC≥98%;0.1ml
700-58-32-金剛烷 規(guī)格: 20mg
632-85-9漢黃芩; 5,7-二羥基-8-甲氧基- 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
523-50-2異補(bǔ)骨脂;Isopsoralen 規(guī)格: 20mg
65243-33-6他美酯 規(guī)格: 100mg
73-32-5L-異亮氨;L-Isoleucine 規(guī)格: 20mg
526-07-8芝林 規(guī)格: 10mg
雌二(E2) 規(guī)格: 3支/套,0.5ml/支
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。