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細胞培養方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

產品名稱：C-33 A(人子宮頸癌細胞)

規格：5×106cells

貨號：YS-02X9554

產品分類:細胞系

儲存條件2℃-8℃，避光儲存

運輸條件冰袋冷藏運輸

注意事項

1、使用產品時應注意無菌操作，避免污染。

2、本產品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3、為保持本產品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。

4、所有產品請于保質期內使用，超出保質期，必須放棄使用。

5、本產品只供進一步科研使用，不可應用于臨床等其他方面。

 

實驗材料：

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶

2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞

3、50ml離心筒2個

4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個

6、細胞計數板1塊；

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；

8、酒精燈1臺；

細胞復蘇步驟：

1：水浴鍋預熱至37℃備用

2：準備15mL離心管，并向其中加入適量培養基待用

3：將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養基重懸細胞，接種至新的無菌培養器皿中

Campy-Cefex添加劑 英文名稱：Campy-Cefex Supplement 產品規格：2ml*5

改良CCD瓊脂基礎(mCCD) 英文名稱：CCDA Base 產品規格：250g

Bolton肉湯 英文名稱：Boltom Broth 產品規格：250g

Mueller-Hinton瓊脂（MHA） 英文名稱：Mueller-Hinton Agar 產品規格：250g

1%馬尿酸鈉 英文名稱： 產品規格：0.4ml/支*20支

頭孢紙（30ug/） 英文名稱：Cephalosporin strip 產品規格：10/瓶

萘啶酮酸紙（30ug/） 英文名稱：Nalidixic acid strip 產品規格：10

改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑A 英文名稱：Modified Camp-BAP Agar additive A 產品規格：1ml*5

改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑B 英文名稱：Modified Camp-BAP Agar additive B 產品規格：1ml*5

TTC 英文名稱：TTC 產品規格：10g

C-33 A(人子宮頸癌細胞)509-15-9鉤吻甲;鉤吻 規格： HPLC≥98%;20mg

30220-46-3巨大戟 規格： 20mg

1802-12-6商陸皂元;Phytolaccageni 規格： 20mg

55576-66-4仙鶴草B(鑒別用） 規格： 20mg

湖北貝母 規格： 5g

2797-51-5藻醌;純品型;標準品;有證書 規格： 0.1g

61371-55-9格列風內酯 規格： 20mg

卷柏(墊狀卷柏) 規格： 2g

19356-17-3骨化三 規格： HPLC≥98%;10mg

20784-50-3補骨脂乙 規格： 20mg