詳細介紹
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產品名稱:MRC-5(人胚肺成纖維細胞 )
規格:5×106cells
貨號:YS-02X9670
產品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
2、本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。
4、所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5、本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復蘇步驟:
1:水浴鍋預熱至37℃備用
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養基重懸細胞,接種至新的無菌培養器皿中
麥芽浸膏湯 英文名稱:Malt Extract Broth 產品規格:200g
酵母粉葡萄糖氯瓊脂(YDC) 英文名稱:Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 產品規格:250g
Candida Elective瓊脂 英文名稱:Candida Elective Agar 產品規格:250g
DTM培養基 英文名稱:DTM Medium 產品規格:250g
DRBC瓊脂 英文名稱:DRBC Agar 產品規格:250g
WORT瓊脂 英文名稱:Wort Agar 產品規格:250g
WORT肉湯 英文名稱:Wort Broth 產品規格:250g
YGC瓊脂 英文名稱:YGC Agar 產品規格:250g
改良綠色酵母菌和真菌肉湯 英文名稱:m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 產品規格:250g
Littman瓊脂 英文名稱:Littman Agar 產品規格:250g
MRC-5(人胚肺成纖維細胞 )乙磷;純品型;標準品;有證書 規格: 0.1g
33570-04-6白果內酯 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
29477-83-6仙環 規格: HPLC≥98%;1mg
104987-11-3 規格: HPLC≥98%;20mg
10097-84-4 規格: 20mg
633-66-9小檗 規格: HPLC≥98%;20mg/支
CAS:67-03-8B1 規格: HPLC≥99%;20mg
細菌內工作標準品(盒) 規格: 10支/盒,100EU/支
野漆樹 規格: HPLC≥98%,20mg/支;
512-04-9薯蕷皂元 規格: HPLC≥98%;20mg
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。