詳細介紹
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
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產品名稱:ACHN(人腎癌細胞)
規格:5×106cells
貨號:YS-02X9530
產品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
2、本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。
4、所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5、本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復蘇步驟:
1:水浴鍋預熱至37℃備用
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養基重懸細胞,接種至新的無菌培養器皿中
Culture培養基 250g 用于食品中細計數
瓊脂LT100 250g 用于食品中細計數
NGKG寒天基礎培地 250g 用于食品中蠟樣芽孢桿分離培養
GYP白亞瓊脂培養基 250g 用于乳酸的分離培養
酪蛋白葡萄糖肉湯 250g 用于霉、酵母等的增培養
支原體培養基 250g 用于培養支原體的基礎培養基
EG培養基 250g 用于絕對厭氧計數
SBG增液 250g 用于沙門氏的選擇性增培養(特別是雞蛋制品中)
BCP寒天培地(含瓊脂) 250g 用于食品中乳酸的計數
大豆胨酵母浸粉瓊脂(PYE) 250g 用于真的選擇性分離培養
革蘭氏陰性增液 250g 用于革蘭氏陰性細增培養
卻普曼瓊脂 250g 用于檢測金
營養鹽瓊脂(AATCC30) 250g 用于檢測紡織品的抗真活性
液體雙抗增液 250g 用于腦膜炎雙球的選擇增培養
ACHN(人腎癌細胞)山梨 規格: 50mg
毛地黃 規格: HPLC≥98%;20mg
125675-09-4苦蒿 規格: 20mg
104112-82-5黃柏 規格: HPLC≥98%,20mg/支
63902-38-5二 規格: HPLC≥98%;20mg
7491-74-9吡拉坦 規格: 100mg
79916-77-1連翹酯A;Forsythoside A 規格: 20mg
50773-41-6重樓皂I 規格: 20mg
迷迭香 規格: 20mg
8特丁凈;純品型;標準品;有證書 規格: 0.25g