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產(chǎn)品名稱:Calu-1(人肺癌細(xì)胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號(hào):YS-02X9562
產(chǎn)品分類:細(xì)胞系
儲(chǔ)存條件2℃-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸
注意事項(xiàng)
1、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準(zhǔn)備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
C20orf195 20號(hào)染色體開放閱讀框195抗體 規(guī)格: 0.2mlATG16L2 自噬體ATG16L2抗體 規(guī)格: 0.2ml
C5ORF4 5號(hào)染色體開放閱讀框4抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654) 磷化相似瘤抑制基因HUGL抗體 規(guī)格: 0.1ml
RNF123 環(huán)指123抗體 規(guī)格: 0.2ml
CACH3/CaV1.3 L型鈣通道a1亞型3抗體 規(guī)格: 0.2ml
RNF7/CKBBP1 環(huán)指7抗體 規(guī)格: 0.2mlNEK9 /激NEK9抗體 規(guī)格: 0.2ml
SCG3/SgIII 分泌粒3抗體 規(guī)格: 0.1ml
JMY 連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 2ml
ZBTB2 鋅指437抗體 規(guī)格: 0.2mlCCDC89 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域89抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CAMK4(Thr196 + Thr200) 磷化鈣/鈣調(diào)依賴性激4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.3ml
Calu-1(人肺癌細(xì)胞)19057-60-4薯蕷皂 規(guī)格: 20mg
十八種氨基(套) 規(guī)格: 100mg/支
119577-28-5/86639-52-37-乙基-10 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
6080-33-7青藤 規(guī)格: 20mg
13657-68-6莪術(shù); 姜黃; 莪 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
73-32-5L-異亮氨 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg
香附 規(guī)格: 1g
15503-87-4光萼野百合;烏拉明 光萼豬屎豆; 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
55466-05-2棗仁皂B 規(guī)格: 20mg
1173-88-2唑林 規(guī)格: 500mg
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。